富含血小板血浆和rhBMP-2复合物诱导兔下颌骨再生的实验研究_临床医学论文.docVIP

富含血小板血浆和rhBMP-2复合物诱导兔下颌骨再生的实验研究_临床医学论文 富含血小板血浆和rhBMP-2复合物诱导兔下颌骨再生的实验研究_临床医学论文 作者：蔡华雄, 宋洁文, 赵小朋, 阮毅, 郑美华, 李海刚【摘要】 【目的】 研究自体富含血小板血浆（PRP）和人重组骨形成蛋白（rhBMP-2）对下颌骨组织形成的促进作用。【方法】 成年新西兰白兔45只，随机分为3组，每组15只，选择右侧下颌骨为实验侧、左侧下颌骨为对照侧。A组右侧下颌骨缺损区放置明胶海绵和PRP，B组右侧下颌骨缺损区放置明胶海绵和rhBMP-2，C组右侧下颌骨缺损区放置明胶海绵、PRP和rhBMP-2，各组左侧下颌骨缺损区只放置明胶海绵。分别于术后2、4、8周各取5只兔子进行放射性核素99mTc-MDP骨显像、X线片和组织学切片检查。【结果】 A组动物右侧放射性核素计数在术后2、4周时明显高于左侧（Ρlt; 0.05）；B组动物右侧放射性核素计数在第4周时高于左侧（Ρlt;0.05），而在第2、8周时低于左侧（Ρlt; 0.05）；C组动物右侧放射性核素计数在第2、4周时均高于左侧（Ρlt;0.05），在第8周时两侧没有明显差别（Ρ gt;0.05）。【结论】 PRP单独或与rhBMP-2复合均能促进下颌骨组织的增长。 【关键词】 富含血小板血浆; 骨形成蛋白; 骨再生 ] 牙槽骨是支持、稳固牙齿、维护咀嚼功能的重要组织，由于炎症、外伤、肿瘤、功能性萎缩等原因，牙槽骨非常容易吸收、丧失，进而影响咀嚼功能。牙槽骨组织的吸收、丧失，导致牙齿松动（牙周炎），义齿、种植牙修复困难，进行牙槽骨移植是重建牙槽骨的重要手段。关于牙槽骨的移植，主要是选择植骨材料的问题。随着医学的不断发展，人们已经发现了众多可供移植的材料，如羟基磷灰石/脱矿骨复合物、医学组织工程材料支架等[1、2]，但至今为止尚未找到一种既安全、经济，又有理想效果的牙槽骨植骨材料。本实验通过同位素骨显影技术观察自体富含血小板血浆（platelet rich plasma, PRP）及人重组骨形成蛋白（recombinant human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2）对兔下颌骨缺损区骨组织代谢的影响，现报道如下。 1 材料和方法 1.1 材料 45只健康成年新西兰白兔（南方医院实验动物中心提供），雌雄不限，体质量2.0～2.5 kg，分笼饲养。人重组骨形成蛋白-2（recombinant human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2），由广州威佳科技有限公司提供。自体富含血小板血浆（PRP），手术前制备。以明胶海棉作为PRP及rhBMP-2的载体。 1.2 PRP的制备 0.03 g/L戊巴比妥钠（0.03 g/kg）腹腔注射麻醉，从兔耳中央动脉抽取5 mL自体血，装在预先放有0.5 mL复方枸橼酸钠抗凝剂的10 mL离心管中,参照Landeaserg法[3]进行PRP提取：将新鲜血分两次离心，第一次离心1 000 r/min（200 × g）×10 min，吸管吸取全部上清液至交界面下3 mm，移至另一离心管，平衡后再次离心1 000 r/min（200×g）×10 min，此时离心管中液体分为两层，吸取约3/4上清液弃掉，摇匀剩余液体，即为PRP，摇匀，备用。经检测，离心前血小板计数为336×109/L，离心后血小板计数为1 498×109/L，离心后的血小板浓度是离心前的450%左右。制作过程严格无菌操作。 1.3 手术与分组 健康成年新西兰白兔45只，随机分为A、B、C3组，每组15只。每只兔在双侧下颌骨体部，即近犬齿、前臼齿根尖处建立骨缺损区，右侧为实验侧，其中A组放置PRP和明胶海绵，B组放置rhBMP-2和明胶海绵，C组放置PRP、 rhBMP-2和明胶海绵；左侧为对照侧，均只放置明胶海绵。 1.4 实验方法 0.03 g/L戊巴比妥钠按0.03 g/kg腹腔注射麻醉，显效后在手术区局部注射0.02 g/L利多卡因。常规备皮、消毒、铺巾。沿下颌骨下缘作平行切口，长度为3～4 cm，分层切开皮肤、皮下组织，暴露下颌骨下缘及下颌骨颊面，用裂钻在下颌骨体部颊侧中下1/3处制备缺损区，长、宽、深分别为8 mm×6 mm×2 mm，手术时使用生理盐水降温，术后使用庆大霉素注射液冲洗防止感染。缺损区制备后，兔子右侧：A组以明胶海绵加PRP填塞，B组以明胶海绵加rhBMP-2填塞，C组以明胶海绵加PRP及rhBMP-2填塞；左侧均以明胶海绵填塞。严密缝合伤口，分笼饲养。术后给予青霉素肌注预防感染，剂量为40万U/次，每天一次，持续3 d。 1.5 观察指标 1.5.1 放射性核素骨显像 各组分别