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第二篇免疫学基础 第十二章 免疫学应用 第一节 免疫诊断和免疫防治 一、免疫诊断与检测 以抗原抗体特异性结合为基础的各种血清学技术已广泛应用于生物学的各个领域。在预防兽医学的应用主要集中在病原微生物的检测与疫病防治两个方面。 诊断液： 诊断抗原：用于检测抗体的各种抗原溶液。包括菌体抗原、类毒素等 诊断血清：用于检测抗原的各种血清制剂。包括抗血清、抗毒素等 免疫诊断与检测 1、传染病检疫： 通过检测相应抗原、抗体对人和动物传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病和变态反应性疾病进行诊断。 血清学反应 变态反应 2、病原的分离鉴定：病毒、细菌的分离鉴定 3、物种鉴定： 物种之间的差异表现在抗原性的不同，物种亲缘越远， 抗原差异越大。 细胞免疫检测技术 1.E 玫瑰花环实验：T淋巴细胞表面有红细胞受体，可结合绵羊等多种动物的红细胞，而形成E玫瑰花环，称为E花环。 用于检测细胞免疫功能 2.EA玫瑰花环实验：B淋巴细胞没有E受体，但有Fc 和C3受体，以抗红细胞抗体作桥，将红细胞连接到B 细胞表面，形成EA花环。 3.淋巴细胞转化实验：是体外测定T淋巴细胞功能的一种方法，T淋巴细胞转变成淋巴母细胞的能力。 第一节 免疫诊断与检测 一、免疫诊断试剂 免疫诊断是应用已知诊断试剂，对患病动物进行抗原或抗体的测定，从而诊断疾病。 用微生物制成抗原诊断液，即利用细菌或病毒经过培养后，将菌体（病毒）灭活（或将菌体裂解）后制成。应用凝集反应的有：布氏杆菌试管凝集抗原、鸡白痢杆菌有色抗原；用于补体结合反应的鼻疽杆菌、布氏杆菌补体结合反应抗原。用于变态反应变应原，如结核菌素、鼻疽菌素，则是用细菌培养、浓缩、裂解、抽提而制成诊断液。 诊断血清是用抗原免疫动物而制成的，一般采用给动物多次注射抗原，然后采集免疫动物血液，分离血清，加入一定防腐剂而制成。 免疫血清经过提纯后得到IgG，再用酶、荧光染料、放射性同位素标记，制成标记抗体。我国一些生物制品厂作为商品进行生产的，有用辣根过氧化物酶标记的抗体，如猪瘟酶标抗体、羊抗兔酶标抗体。用荧光染料标记抗体，有猪瘟荧光抗体、鸡新城疫荧光抗体。用同位素标记的抗体，有测定动物激素含量的试剂盒等。 二、免疫诊断与检测的应用 （一）用于家畜传染病的检疫 1.用血清学方法诊断疫病 利用抗原抗体反应的特异性、敏感性来诊断疾病。用已知抗原诊断液，检查患病动物血清中是否存在有相应的特异性抗体，借以诊断传染病。亦可用已知诊断血清或标记抗体，检查动物体内及排泄物中是否存在特异性抗原，用以检查病原体的存在。常用的血清学诊断方法有沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应等。 （二）用于病原的分型与鉴定 用已知抗血清或不同型的单因子血清，对分离的病原菌进行鉴定，以确诊该病原。用单因子血清分析细菌的抗原组分，确定细菌的类型，如用沙门氏菌的单因子血清分析待检沙门氏菌的菌体抗原及鞭毛抗原的种类，从而确定该菌属何种沙门氏菌。 （三）细胞免疫功能的检测 动物机体对疾病的抵抗力，决定于机体的免疫状态，其免疫力的强弱除了抗体外，还有细胞免疫功能。测定细胞免疫功能，能说明机体的总体免疫力，对疫病的预防及治疗具有重要的指导意义。 2.EA玫瑰花环试验 B细胞膜上有抗体受体，鸡红细胞与抗鸡红细胞的抗体结合后，能结合在B细胞表面而形成花环，这种花环可用于B细胞的测定。 3.淋巴细胞转化试验 T细胞在植物血凝素(PHA)作用下，转化为淋巴母细胞，T细胞转换率高，则T细胞的免疫活性强，可用以测定T细胞的功能。 第二节 免疫预防及免疫治疗 免疫学应用的一个重要目标是免疫预防及免疫治疗，就是利用人工自动免疫与人工被动免疫两方面。 人工自动免疫是给动物注射（或吸入、饮服）一定种类的疫（菌）苗或类毒素，使其产生对该种微生物的抵抗力，以达到预防传染的目的。 人工被动免疫是给动物注射免疫血清（或病愈动物血清），使动物获得免疫性，用于紧急预防或治疗传染病。 一、免疫预防 （一）疫苗的种类 动物机体获得对某种传染病的免疫力可通过4种途径： 天然主动获得—自然感染病愈（免疫时间长）。 人工主动获得—接种疫苗（较长）。 天然被动获得—幼畜从初乳获得母源抗体； 幼禽从卵黄获得母源抗体(短)。 人工被动获得—人工注射