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基因组学4.pdf

4.1 DNA测序的方法 第4章 基因组测序 化学降解法测序(Chemical degradation 4.1 DNA测序的方法 method ) 链终止法测序(The chain termination 4.2 DNA序列的组装 method ) 4.3 基因组测序进展 自动化测序(Automatic sequencing ) 焦磷酸测序(Pyrosequencing ) 4.4 EST测序 芯片测序 几种必威体育精装版的测序方法 1 2 化学降解法测序步骤 化学降解法测序 双链 降解 在选定的核苷酸碱基中引入化学集团, 再用化合物处理,使DNA分子在被修饰的 单链 位置降解,根据片段的大小依次读取序列。 电泳分离 末端标记 读序列 核苷酸修饰 3 4 Maxam-Gilbert法所用的化学修饰技术 化学法测序 碱基 特异修饰方法 pH 8.0,用硫酸二甲酯对N7进行甲基化,使C8-C9键对 硫酸二甲酯 G 碱基裂解有特殊敏感性 pH 8.0,哌啶甲酸可使嘌呤环的N原子化,从而导致脱 A+G 嘌呤,并因此消弱腺嘌呤和鸟嘌呤的糖苷键 C+T 肼可打开嘧啶环,后者重新环化成五元环后易于除去 C 在1.5 mol/L NaCl存在时,可用肼除去胞嘧啶 5 6 1 序列的 链终止法测序 读取 以单链DNA为模板,设计与之配对的引物, 在DNA聚合酶的作用下合成新链,其中一种为

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