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专题2微生物培养与应用.ppt
(2)计数规则 ①计算方法:每克样品中的菌落数=(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用稀释液的体积(mL) M代表稀释倍数 ②设置对照:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 选择菌落数在30~300的平板进行计数 若某两个或多个稀释浓度下获得的菌落数均符合条件时,要看两者菌落数的比值,若小于2,则取两者的平均值;若大于2,则取较小值 1.关微生物营养物质的叙述中,正确的是 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 D 硝化细菌氧化氨获得化学能 NaNO3提供氮源 CO2不能提供能量 蛋白质既是碳源也是氮源。 3. 09(安徽)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是 A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,370C恒温培养24-48小时 D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 D 应该选择菌落数在30—300的平板进行计数 4.09(重庆)下列有关大肠杆菌的叙述,正确的是 A.大肠杆菌以复制方式进行繁殖,其拟核是一个环状DNA分子 B.在含葡萄糖和乳糖的培养基上,大肠杆菌首先利用乳糖作碳源 C.用大肠杆菌工程菌生产干扰素时.应及时添加核酸等生长因子 D.处于对数期(生长快、繁殖快时期)的大肠杆菌.常作为生产用的菌种和科研的材料 D 应该添加氨基酸 5.宁夏09(15分) (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______ 等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗和______;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能__________。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_______。 生活周期短 温度 酸碱度 易培养 灭菌 消毒 损伤DNA结构 比例合适 (4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。 (5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 (6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 鉴定 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生。 灭菌 6. 09(10分)(全国理综2) 利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。 (1)实验步骤: ①配置________(固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为________。 ②将_____________接入已灭菌的培养基平板上。 ③立即用适当剂量的紫外线照射,其目的是___________________。 固体 玉米淀粉 野生菌株 对野生菌株进行诱变 ④菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_______________ 现象的菌落即为初选菌落,经分离、纯化后即可达到实验目的。 (2)若已得到二株变异菌株I和II,其淀粉转化率较高,经测定菌株I淀粉酶的催化活性高,菌株II的淀粉酶蛋白含量高,经进一步研究发现,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推测出菌株I的突变发生在________区,菌株II的突变发生在_________区。 (透明圈)浅色范围大 编码 非编码 表达的蛋白质多。 产生高效酶的基因 7.右表是某微生物培养 基成分,请据此回答: (1)右表培养基可培养的微生物类型是: (2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。如不想 浪费此培养基,可再加 入: 编号 成分 含量 ① 粉状硫 10g ② (NH4)2SO4 0.4g ③ K2HPO4 4.0g ④ MgSO4 9.25g ⑤ FeSO4 0.5g ⑥ CaCl2 0.5g ⑦ H2O 100ml 自养型微生物 含碳有机物
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