中药吸入制剂苏冰鼻吸贴的临床前研究.doc

中药吸入制剂---苏冰鼻吸贴的临床前研究 李孝栋1* 吴符火1 张凌燕2 陈燕1 叶蕻芝2 钟红斌3 金玉斌1 （1. 福建中医学院药学系药剂教研室 福州 350108; 2. 福建省中西医结合研究院 福州 350108 3. 福建省闽侯仙健药物研究所 福州 350108） 摘要：目的 完成中药新剂型--苏冰鼻吸贴的临床前研究；方法 利用GC-MS技术，确定鼻吸贴中挥发性物质的化学成分，并通过体内药动学试验对体内外化学成分进行比较；在此基础上，进行了抗缺氧试验、安全性评价试验以及体外释放度与体内吸收度的相关性研究，为建立合理可行的质量标准奠定基础。结果 体外药物成分含有苄基苯甲酸酯、苄基肉桂酸酯、冰片等，和方中苏合香、冰片成分一致。体内药物研究，冰片以原型药物形式入血产生疗效，其他药物转为代谢产物发挥作用。药效学试验结果表明具有较好的抗缺氧作用，体内外相关性和安全性也较好。结论：苏冰鼻吸贴的临床前研究结果良好，从冰片的血药浓度变化可知该制剂具有较好的速效、长效的作用，治疗心血管疾病的疗效确切，具有诱人的前景。 关键词 中药吸入制剂；苏冰鼻吸贴；临床前研究 鼻吸贴，又称为鼻吸芳香贴剂，是指挥发性的药物和适宜的基质混合后附着或涂抹于贴剂的一面，当贴剂的另一面贴于鼻子下方“人中”部位时，暴露于空气的药物以气体形式经鼻子吸入肺部发挥局部或全身治疗作用的一种吸入制剂。这里的贴剂与经典贴剂不同，不作为透皮吸收制剂，只利用贴剂粘胶层的粘性起附着作用。 鼻吸贴具有明显的优点[1]，对心血管疾病、肺部疾病和鼻炎等疾病具有良好的治疗效果，本文对治疗心血管疾病的苏冰鼻吸贴进行了临床前研究。 一、仪器与试药 日本岛津GCMS-QP5050A型气相色谱-质谱联用仪，CLASS-5000数据处理系统；安捷伦Agilent 6890N气相色谱仪；旋转蒸发仪RE-52AA（上海亚荣生化仪器厂），KQ2200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），苏冰鼻吸贴（自制），冰片对照品（中检所），体外释放度装置（自制），XW-80A型漩涡混合器（上海医科大学仪器厂）；80-2型台式高速离心机（上海安亭科学仪器厂）；R200D天平（Sartorius, Germany）；家兔与小鼠（购自福建中医学院动物房），SD大鼠（购自上海斯来克公司，许可证号SCXK（沪）2007-0005，质量合格证号No.0044115），无水乙醇、甲醇等其它试剂均为分析纯。 二、体内外化学成分的分析 2.1 方法 2.1.1 分析条件 DB-5MS弹性石英毛细管柱（30m*0.25mm i.d*0.25μm）；柱温：80oC 5oC/min 220oC(保持15min)；载气：He，流速：1ml/min；进样口温度：250 oC；分流进样，分流比10：1。质谱条件：电子轰击（EI）离子源，电子能量：70eV；扫描范围：33u—500u；GC-MS接口温度：230oC；倍增器电压：1000V；NIST107谱库。按上述色谱分析条件，每次进样5μl。 2.1.2 体外分析样品的制备 称取0.71g苏冰鼻吸贴样品，摊薄后，加入50ml无水乙醇浸泡10分钟，再超声提取20分钟，过滤，滤液回收乙醇，残留部分用甲醇溶解于10ml量瓶内，甲醇定容，作为分析样品。 2.1.3 体内试验过程 取家兔3只，雄性，2kg左右，试验前禁食12h，将0.71g苏冰鼻吸贴贴在家兔鼻子下，分别在第0、0.5、1、1.5、2、3、4、5、6小时时间点耳缘静脉取血。血样离心，取上清液，作好标记，备用。 2.1.4 体内血浆样品的制备 分别取家兔空白血浆和血浆样品1至8号各300μl，加入等量乙腈，旋涡混匀5min，超速离心5min（12000r/min），取上清液，再加等量氯仿萃取，旋涡混匀5min，超速离心使分层，取氯仿层，在水浴50℃条件下，氮气挥干，分别加100μl氯仿复溶即得。 2.2 结果 2.2.1 体外样品中药物成分的分析 体外样品经GC-MS测试和图谱验证，在前20个峰中，确定峰面积大、清晰度高的成分有苄基苯甲酸酯、冰片、18-去松香烷、苄基肉桂酸酯等，其中苄基苯甲酸酯、苄基肉桂酸酯和冰片分别为方中苏合香和冰片主要成分，与文献报道一致[2]。见图1、图2、图3和表1。 图1: 鼻吸贴中成分的GC-MS总离子流图 图2 冰片的离子流和质谱图 图 图3 苄基苯甲酸酯的MS图 表1 苏冰鼻吸贴体外药物主要挥发性成分和含量 Compound Benzyl benzoate borneol 18-Norabietane Benzyl cinnamate Content(%) 5.37 82.4 3.44 1.48 2.2.2 体内样品中药物成分的分析 将家