临时切片装片涂片的制作和观察指导.doc

临时切片装片涂片的制作和观察、指导 ——生科一组 指导途径： 1、 做实验前要引导学生认识了解显微镜各部分结构名称与作用，以及熟练操作显微镜，这就要求指导老师更要掌握这方面的技能。同时作为一名合格的老师这也是必备的，这就要求我们要多练。 2、 给同学讲述并演示操作步骤，让他们产生视觉上的感受。 3、 重点细讲关键点。 （1）切片。示范手握刀片与材料的方法以及切片的动作。防止切伤手指同时也能切下需要的薄片。 （2）装片。示范怎样用镊子撕下表皮细胞或用刀片轻轻刮出表皮细胞。 （3）涂片。示范涂片的方法操作以及 引导学生进行染色。 4、 引导学生规范操作进行实验。 5、 实验进行过程中鼓励学生积极提出建议，活动思维。 6、 在显微镜下观察到实验目标后，让学生描述其特点，不用全部说出，每人说一点即可，锻炼学生的自信心。 7、 给学生留下作业，让其画出看到的目标，并标出各部分的名称，强化知识。 8、 补充：口腔上皮细胞临时装片可能不易一次做成功，看不到目标细胞。这就要求指导老师带领学生多做几遍，在熟练方法的基础上做成功。 （一）切片 1目的要求： 用光学显微镜观察的样品必须是薄而透明的，因此，无论是临时装片还是永久制片的玻片标本，制作前都必须先将材料切成薄片。徒手切片法简称手切片法，即以手持刀片将材料切成能在显微镜下观察其内部结构的薄片的方法。 2材料： 空心莲子草、土豆块茎、刀片、培养皿、清水、毛笔、显微镜、纱布、擦镜纸、胶头滴管、载玻片、盖玻片。 3实验步骤： 擦净载玻片和盖玻片。 材料的准备。采集空心莲子草的茎作为实验材料，同时将它放到清水中以防萎蔫。还有土豆的块茎作为辅助材料。 执握刀片和材料的方法。左手大拇指和食指的第一关节指弯夹住材料（用土豆块茎将空心莲子草夹住），使之固定不动。为防止刀伤，拇指应略低于食指，并使材料上端超出手指2～3毫米，不可高出过多，否则切片时材料容易弯折，也不容易切薄。右手大拇指和食指捏住刀片的右下角，刀口向内，并与材料切面平行，切片前先将材料和刀口上蘸些水，使之切时滑润。 切片。左手保持不动，以右手大臂带动前臂，使刀口自外侧左前方向内侧右后方拉切，同时观察切片的进展情况。动作迅速，切忌中途停下，切下数片后，用湿毛笔将切片轻轻移入培养皿的清水中备用。 制作临时装片。将载玻片上滴一两滴清水，选择薄的且厚度均匀的切片放到载玻片上，制成临时装片。 镜检。用显微镜观察空心莲子草的维管组织。 4实验记录： 在显微镜下看到清晰的空心莲子草细胞以及它的维管组织。 改进点在实际实验操作中的效果： 1、切片时可以用相对较硬的土豆等夹住空心莲子草。 优点：可能更易切出薄片，使操作更加简单，不过能不能实现还得看实际操作。 实际效果：理想很丰满，现实很骨干，在实际实验操作中不是很成功。当土豆片夹住空心莲子草时，另一只手会受到影响从而判断不准，反而不容易切割。就好像一只手拿住刀在空中切另一个物体一样，掌握不好力度。 2、两个刀片切，取刀片中间的那个薄切片。 优点：不用快速的切，节省实验时间。 实际效果：两个刀片之间的薄片，大多数比较薄，但是基本上都不完整，而且容易拉伤，不过还是能找到一些在显微镜下观察到维管束细胞，还是可以借鉴的。 总结： 1、熟练操作显微镜，以及学会制作临时装片。 2、在切片时指导老师要规范学生的操作，以免发生割伤手指的事情，如果发生意外要保持冷静，不要慌张，及时给学生进行伤口处理（提前准备好酒精纱布药品等）。 （二）装片 1目的： 观察玉米叶片下表皮细胞的气孔。 2材料： 玉米叶片、清水、刀片、显微镜、擦镜纸、剪刀、胶头滴管、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片。 3实验步骤： 擦净载玻片和盖玻片。 用刀片轻轻刮取玉米叶片的表皮细胞。再用刀片切出一个正方形来，防止其折叠。 将载玻片上滴上一两滴清水，将取下的玉米下表皮放到载玻片的清水上。 用解剖针或镊子将其展开平铺到载玻片上。 用镊子拿住盖玻片，先将一侧盖在水滴上，另一侧轻轻放下（防止出现气泡）制成临时装片。 用显微镜观察叶片下表皮细胞及它的气孔。 4实验记录： 观察到清晰的玉米下表皮细胞以及气孔（保卫细胞）。 改进点： 1、可以将玉米叶片直接放到载玻片上，再用刀片的中间位置轻轻的刮玉米叶片，直至剩下最薄的一层表皮细胞。 优点：直接放到载玻片上刮，减小了刮破的概率，用刀片的中间刮也是同样的道理。 实验效果：将玉米叶片直接放到载玻片上，省去了转移的过程，不容易出现重叠现象，较为实用。用刀片的中间位置轻轻刮而不是用镊子撕，用力得当很容易刮出只剩下一层细胞，也比较成功。 总结： 1、刀片危险，反复强调。 2、玉米叶片要选比较嫩的。 （三）涂片 1、目的： 观察口腔上皮细胞的形态。 2、材料： 消毒的牙签、口腔上皮细胞、蒸馏水、0.9%生