2014-2015学年第二学期2014级硕士研究生仪器分析课程考试试题.docVIP

河 南 科 技 学 院 硕 士 研 究 生 课 程 考 试 试 题 （A卷） （2014-2015学年 第 二 学期） 课程名称 仪器分析 命题教师 陈仕均 审题教师 阅卷教师 陈仕均 考试日期： 2015 年06月15日 考试方式 开卷 一、名词解释（20分，每小题4分）： 1、相对离心力 相对离心力是指在离心力场的作用下，颗粒所受离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度（g=9.8m/s2），来表达离心机转速 2、区带电泳 指有支持介质的电泳，待分离物质在支持介质上分离成若干区带。 3、亲和层析 利用生物大分子之间特有亲和力的不同进分离纯化的方法。 4、实时荧光定量PCR: 是将荧光能量传递技术应用于常规多聚酶链式反应仪中，通过受体发色团之间偶极-偶极相互作用，能量从供体发色团转移到受体发色团，受体荧光染料发射出的荧光讯号强度与DNA产量成正比，检测PCR过程的荧光讯号便可得知靶序列初始浓度，从而达到定量目的。 5、二次电子: 物质原子核外电子受入射电子激发后，从入射方向逸出样品表面的电子，称为二次电子。 说明：试题必须打印或用碳素墨水钢笔填写，要求字迹工整书写清楚。 二、判断正误，正确的打√，错误的打×（40分，每小题2分）： 1、超纯水出水电导率值为0.055μs/cm或18.2 Ω.cm。 （ 1 ） 2、等密度区带离心法所用的梯度介质为蔗糖溶液，差速区带离心法梯度 介质通常用氯化铯。（ 2 ） 3、离心力就是相对离心力。（ 2 ） 4、在细胞破碎过程中，微型探头在空气中振荡可以超过10秒钟。（ ） 5、在引物设计过程中，G+C含量应在40%～60%。（ 1 ） 6、等点聚焦pH梯度的选择原则是先窄后宽，先线性后非线性。（ 2 ） 7、等点聚焦过程中出现电压低，达不到最高电压可能原因之一是样品盐 浓度太高。（ ） 8、发射光与激发光峰值的差值称为斯托克斯位移（Stokes shift）。Stokes shift在大于24nm时，应使用5nm激发带宽 和12nm发射带宽才能正确 检测荧光值。（ ） 9、荧光共振能量转移程度与供体、受体分子的空间距离紧密相关， 一般 为7～10 nm 时即可发生荧光共振能量转移，随着距离延长，荧光共振能 量转移呈显著增强。（ 2 ） 10、时间分辨荧光需要特殊荧光色团比如铕、铽、钐的螯合物。（ 1 ） 11、AKTA核酸蛋白纯化系统实验结束后，应用20%酒精进行系统冲洗或泵冲洗。（ ） 12、电感耦合等离子体发射光谱仪不能检测非金属元素。（ 2 ） 说明：试题必须打印或用碳素墨水钢笔填写，要求字迹工整书写清。 13、气相色谱和质谱分析过程都是在气态下进行的。（ 1 ） 14、扫描电镜在高真空（＜10-2 pa）模式下使用ETD探测器，样品适用于干燥导电固体材料的观察。（ 1 ） 15、扫描电镜在低真空（10-130pa）模式下使用LF探测器，样品适用于含水量较小，不导电或半导体材料的观察。（ 1 ） 16、扫描电镜在环境真空（130-2600pa）模式下使用GSED探测器，样品适用于含水、含油或液体材料的观察。（ 1 ） 17、一般情况下，扫描电镜在操作含水量较高或变形较大的样品时应采用较低真空，而且操作时间尽量要慢。（ 2 ） 18、蛋白质的纯化方法有透析法、离心沉淀法、电泳法、脱盐和凝胶过滤层析法。（ 1 ） 19、下图为血清蛋白通过醋酸纤维薄膜的电泳图谱，含量最多的蛋白质是清蛋白，含负电荷最多的球蛋白是γ-球蛋白，相对分子质量最大的球蛋白是γ-球蛋白。（ 2 ） 20、俄国植物学家茨维特提出了色谱法，用碳酸钙填充玻璃管，以石油醚洗脱植物色素的提取液，植物色素在碳酸钙柱中实现分离，观察到了胡萝卜素、叶黄素、叶绿素A和B等色带。（ 1 ） 说明：试题必须打印或用碳素墨水钢笔填写，要求字迹工整书写清。 三、简述题（40分，每小题10分）： 1、简述醋酸纤维素薄膜电泳的操作过程。 1.膜的预处理：必须在电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。 2.加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过μL，相当于60-80μg的蛋白质。 3.电泳：可在室温下进行。电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。 4.染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋