10上部现代仪器分析分离方法.ppt

洗脱色谱不仅能使试样各组分获得良好的分离，色谱峰清晰，同时除去冲洗剂后，可获得纯度较高的物质，是目前使用最广的一种方法。线性洗脱色谱：两相间的浓度呈线性关系非线性洗脱色谱：两相间的浓度不呈线性关系 （1）当试样中各组分在两相的分配系数不同时，就能实现差速迁移，达到分离的目的。（还可根据时间长短进行定性）（2）让足够量的流动相通过色谱柱，就能在柱的末端收集到各组分。（3）如果柱的末端有检测系统，并能以信号大小对时间作图，则可得到呈高斯分布的色谱流出曲线。 §19—3??色谱法基本理论 (3)净化器??净化器是用来提高载气纯度的装置。净化剂主要有活性炭、硅胶和分子筛、105催化剂，它们分别用来除去烃类物质、水分、氧气。 (1)进样器 ?目前液体试样的进样，一般都用微量注射器，常用的规格用1μL、5 μL 、10 μL和50 μL等。???(2)气化室??为了让试样在气化室中瞬间气化而不被分解，因此要求气化室热容量大，无催化效应。为了尽量减小柱前谱峰变宽，气化室的死体积应尽可能小。 微分型检测器:分为浓度型和质量型 浓度型检测器(如热导池、电子捕获检测器)测量的是载气中组分浓度的瞬时变化，即响应信号正比于载气中组分的浓度。 质量型检测器(如氢火焰离子化检测器)的响应值正比于单位时间内组分进入检测器的质量。 影响热导池灵敏度的因素?? 热导池检测器是一种检测柱流出物把热量从电热丝上传走的速率的装置，因此从热丝上带走热量的效率越快，其灵敏度就越高。 影响灵敏度的主要因素有：桥路电流、载气、热敏元件的电阻值及电阻温度系数，池体温度等 电子捕获检测器是一个具有高灵敏度和高选择性的检测器。它经常用来分析痕量的具有电负性元素的组分，如食品、农副产品中的农药残留量，大气、水中的痕量污染物等。 缺点：电子捕获检测器是浓度型检测器，其线性范围较窄(102～104)，因此，在定量分析时应特别注意。 §19—5??定性和定量分析??????? ?一、定性分析???? 色谱定性分析的任务是确定色谱图上每一个峰所代表的物质。在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留时间。因此，在相同色谱条件下，通过比较已知物和未知物的保留值，即可确定未知物是何种物质。但是，一般来说，色谱法是分离复杂混合物的有效工具，如果将色谱与质谱或其它光谱法联用，则是目前解决复杂混合物中未知物定性分析的最有效的技术。 ?二、定量分析????在一定的色谱条件下，组分i的质量(mi)或其在流动相中的浓度，与检测器响应信号(峰面积Ai或峰高hi)呈正比： 和 是绝对校正因子：(19—30)和(19—31)式是色谱定量分析的依据 . (一)响应信号的测量???? 色谱峰的峰高是其峰顶与基线之间的距离，测量比较简单，特别是较窄的色谱峰。???? 测量峰面积的方法分为手工测量和自动测量两大类。现代色谱仪中一般都装有准确测量色谱峰面积的电学积分仪。如果没有积分装置，可用手工测量，再用有关公式计算峰面积。峰面积的大小不易受操作条件如柱温、流动相的流速、进样速度等的影响，从这一点来看，峄面积更适于作为定量分析的参数。 (三)定量方法???? 色谱法一般采用外标法、内标法和归一化法进行定量分析。???? 外标法的优点是操作简单，因而适于工厂控制分析和自动分析；但结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性.???? 当只需测定试样中某几个组分，或试样中所有组分不可能全部出峰时，可采用内标法。具体做法是：准确称取试样，加入一定量某种纯物质作为内标物，然后进行色谱分析，再由被测物和内标物在色谱图上相应的峰面积(或峰高)和相对校正因子，求出某组分的含量。 根据内标法的校正原理，可写出下式： 式中ms、m分别为内标物质量和试样质量(注意：m不包括ms)，Ai、As分别为被测组分 和内标物的峰面积； 、 把分别为被测组分和内标物的相对质量校正因子。 在实际工作中，一般以内标物作为基准，即=1，此时(19—38)式可简化为 色谱法采用内标法定量时，因在试样中增加了一个内标物，常常给分离造成一定的困难。 归一化法是主要用于色谱法的一种定量方法。它是将试样中所有组分的含量之和按100％计算，以它们相应的色谱峰面积或峰高为定量参数，通过下列公式计算各组分的质量分数： 当各组分的 相近时，计算公式可简化为 使用这种方法的条件是：经过色谱分离后，试样中所有的组分都要能产生可测量的色谱峰。 ???? 归一化法的主要优点是：简便、准确；操作条件(如进样量，流速等)变化时，对分析结果影响较小。这种方法常用于常量分析，尤其适合于进样量少而其体积不易准确测量的液体试样。