熊果酸提取与结构鉴定.ppt

熊果酸提取与结构鉴定 制剂082刘泽华 实验药材：枇杷叶 熊果酸 熊果酸(ursolic acid)是一种三萜酸又名乌索酸乌苏酸与齐墩果酸是差向异构体,属非极性的五环三萜类化合物相对分子量为4 5 6 . 6 8，熊果酸具有镇静抗炎抗菌抗糖尿病抗溃疡降低血糖等多种生物学效应近年来发现它具有抗致癌抗促癌诱导F 9 畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用极有可能成为低毒高效的新型抗癌药物另外熊果酸具有明显的抗氧化功能因而被广泛地用作食品医药和化妆品原料。 熊果酸药理作用 镇静作用 抗炎抗菌作用 增强机体免疫力 抗肿瘤作用 抗疟作用 抗艾滋病作用 保肝抗肝炎 抗氧化 中外发展状况 Kawaguchi N等用熊果酸或其盐制成乳化剂，用于胰腺炎的修复。 陈武等1201研究发现熊果酸在制备治疗病毒性肝炎药物中不论单独使用，还是与其它药物配合使用。只要制备成药品或保健药品均具有显著治疗病毒性肝炎的作用。 石川弘伦等发明了一种毒性程序较低的转移抑制剂，熊果酸或其盐作为活性成分，可以口服或通过注射给药，使患者能接受手术后不卧床治疗。熊果酸对杀灭和抑制变形链球菌组及牙周病原菌、口腔舌癌细胞具有明显的效果，可作为有效成份用于制备口腔卫生用品、口腔保健品及制各治疗口腔疾病的药物。 谭仁祥等研究证实了熊果酸的抗抑郁作用，并将含有熊果酸的紫苏提取物作为治疗抑郁症的药物。熊果酸的抗抑郁作用和抗抑郁的首选西药氟西汀相似，但其几乎没有副作用，相比西药的抗抑郁谱窄、毒副作用大，用药后易复发和诱发自杀倾向等有着显著的优势。 实验目的与意义 实验目的：从天然药物中提取熊果酸，并鉴定其结构 。 实验意义：熊果酸具有镇静、抗炎、增强机体免疫力、抗菌、美白、抗癌等药理作用，近年更被中国医学科学院肿瘤医院实验证明其有望成为低毒、有效的新型天然抗癌药物，因而具有很强的研究开发价值。 实验内容及方案 提取工艺：称取地榆粉末200 g置于烧杯中，用6倍量95％乙醇超声提取3次，每次30min。合并3次提取液，过滤除去残渣，减压回收乙醇，得浸膏。 超声波作用原理：超声波在媒质中传播可使媒质质点在其传播空间内进入振动状态强化溶质扩散、传质，即超声波机械机制。 提纯工艺 浸膏依次用石油醚、1％氢氧化钠水溶液、水洗至洗出液近无色，烘干。再用无水乙醇加热溶解，用热乙醇反复洗涤残渣，合并滤液及洗液，蒸去部分乙醇，放冷，静置，得白色片状结晶；过滤，滤饼加人甲醇，加热煮沸，趁热过滤，滤渣反复用乙醇重结晶得白色针状结晶约。 纯化的讨论 1.加水沉淀 熊果酸难溶于水，在乙醇提取液中加入适量纯化水，增大溶液极性可使熊果酸析出完全。此操作经济、简易，可除去游离糖及大部分黄酮，且熊果酸损失极少。 2.碱溶解酸沉淀熊果酸易溶于氢氧化钠水溶液和醇溶液，经过碱溶解酸沉淀的方法，可有效除去黄酮及其它极性大的杂质。 3.脱色熊果酸粗品中含有少量棕黄色极性较小的杂质，可通过活性炭脱色除去。操作时应注意控制活性炭用量，用量过大会降低熊果酸产率。 纯度测定：薄层色谱法 分别取样品用乙醇溶解后制成1 g/L 的溶液，用毛细管分别点样适量于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一氯仿一乙酸乙酯一甲醇(20：5：8：0．5)为展开剂，展开(展距9．0 cm)，取出、晾干喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，置日光灯下检视。观察样品色谱中，是否为单一斑点且无其他斑点则证明样品为纯的熊果酸. 结构鉴定 定性分析 原理：熊果酸为3位羟基的五环三萜化合物，具有萜类的特征反应。三萜化合物在无水条件下，与强酸(硫酸、磷酸、高氯酸)、中等强酸(三氯乙酸)或Lewis酸(氯化锌、三氯化铝、三氯化锑)作用，会产生颜色变化或荧光。 a.结晶样品约o.5mg，加o.5 mL乙醇溶解，加0.5％对二甲氨基苯甲醛浓硫酸溶液2 mL，溶液呈褐色，加5滴水颜色变为褐橙色，加15滴水后变为紫红色。 b.取结晶样品I约0.5 mg，加醋酐1 mL溶解后沿试管壁加入少量浓硫酸(不要搅乱两液接触面)，在两液层中间出现紫色环。 定量分析 a紫外一可见分光光度法：精密称取熊果样品适量，加甲醇溶解并稀释制成每lml中含10．20mg的溶液，在190-400mn波长范围内扫描。判断样品在甲醇溶液中的紫外吸收205．4nm与标准图谱是否一致. b红外光谱法：由红外光谱数据可知：结构中有C=O， 一OH，一CH3，判断样品与对照品图谱是否一致。 实验仪器与材料 实验器材：超声波仪 ，紫外光谱仪，红外光谱仪，高效液相色谱仪。 原料与试剂：地榆粉 500g，，薄层层析硅胶G ，95%乙醇，1%氢氧化钠水溶液 ，石油醚 ，甲醇 ，活性炭 ，环乙烷 ，氯仿 ，乙酸乙酯 ，对二甲氨基苯甲醛 ，浓硫酸 。 参考文献 韩小龙，《从枇杷叶中提取、分离熊果