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组织工程：技术与进展 Tissue Engineering: Related Techniques And Progresses 上海医学院 细胞与遗传医学系 左 伋 一、相关技术 细胞体外培养 细胞融合 DNA和染色体介导的基因转移 干细胞分离与建立 转基因动物 （一）细胞体外培养 Applications of Rotary Cell Culture Research Cancer HIV Tissue Modeling Virus Vector （一）细胞体外培养 Applications of Rotary Cell Culture Tissue Regeneration Liver Pancreas Skin Heart Valve Nerve Cartilage Kidney Blood Blood Vessels Bone Marrow （一）细胞体外培养 Applications of Rotary Cell Culture Production Monoclonal Antibodies Polypeptides from Transformed Insect Cells Proteins, Pharmaceuticals Undiscovered Proteins from Differentiated Cultures （一）细胞体外培养 （二）细胞融合 细胞融合是两个（同种或不同种）活细胞紧密接触，接触部位的细胞膜发生融合。这样，两个细胞的细胞质、细胞器互相交流，最后完全合并成一个细胞，通过培养，这个细胞有可能发育成完整的生物个体，即原来两个细胞所属物体的杂种后代，这个杂种后代有可能兼有两个上代的一些性状。 （二）细胞融合 生物受精过程的实质是父本与母本的生殖细胞（配子）互相融合。这两个配子在形成新的合子上各自作出了同样贡献。关键过程是两个的细胞核相互融合。 （二）细胞融合 细胞融合是把细胞成分如遗传物质从一细胞迁移或者移动到另一种细胞，两个不同细胞的内含物混合后，创造一种含有两个融合伴侣的全部基因的杂种，这样的杂种未必是稳定的或能活的。尤其当细胞是来自两个不同物种的时候。 （二）细胞融合 细胞融合方法 融合本身不容易达到目的，通常还需要使用病毒或者化学物质来进行帮助。 如仙台病毒、PEG等 融合细胞的筛选 抗药性、营养缺陷和温度敏感 （二）细胞融合 细胞融合的应用 获得具有新特征的细胞，医学如细胞治疗 （二）细胞融合 （二）细胞融合 （二）细胞融合 三、DNA和染色体介导的基因转移 DNA介导的基因转移 磷酸钙沉淀 载体携带：脂质体 显微注射 三、DNA和染色体介导的基因转移 染色体介导的基因转移 染色体直接转移 微细胞技术 三、DNA和染色体介导的基因转移 基因转移细胞的筛选 G418 基因转移技术的应用 三、DNA和染色体介导的基因转移 三、DNA和染色体介导的基因转移 三、DNA和染色体介导的基因转移 四、干细胞分离与建立 五、转基因动物 1974年，美国学者Jaenisch首次用显微镜注射法获得转基因小鼠。 1981年，美国科学家成功地将外源基因导入动物胚胎，创立了转基因动物技术。1982年获得转基因小鼠。 1987年，世界上第一只商业化转基因绵羊在英国著名的罗斯林研究所诞生。这只转基因母羊的乳汁中可以分泌α—抗胰蛋白酶，含量高达30毫克/升。 1989年，意大利学者用精子作为载体转移目的基因，成功地获得了纯系转基因小鼠。 1997年2月，英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊“多利”培育成功。 1997年10月，英国罗斯林研究所（Roslin）宣布已成功克隆出3只携带有人凝血因子Ⅸ基因转染绵羊。 1999年2月，上海遗传研究所宣布转基因试管牛“滔滔”诞生，其体内被检测到带有人的血清白蛋白基因，这项成果被评为当年“中国十大科技进展”之一。 五、转基因动物 转基因动物（transgenic animal）技术是通过遗传