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* 基础回归14　生物技术实践 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 基础回归14 * 4.植物的组织培养 (1)激素的作用 植物组织培养过程中培养基中激素的使用与分裂、分化、脱分化、再分化的关系先使用生长素，后使用细胞分裂素 先使用细胞分裂素，后使用生长素 同时使用 生长素用量与细胞分裂素用量比值高时 生长素用量与细胞分裂素用量比值低时 生长素用量与细胞分裂素用量比值适中时 (2)酶在洗涤方面的应用——加酶洗衣粉种类 洗涤原理 洗涤的物质种类 使用注意事项 蛋白酶 可将蛋白质水解为易溶解或分散于洗涤液中的小分子的肽或氨基酸 血渍、奶渍及各种食品类的蛋白质污垢 使用加酶洗衣粉时，应按产品包装说明上的要求，注意水温及衣物的纤维种类，达到既去污又不损伤衣物纤维的目的 脂肪酶 把脂肪水解为较易溶解的甘油和脂肪酸 食品的油渍、人体皮脂、口红 种类 洗涤原理 洗涤的物质种类 使用注意事项 淀粉酶 能使淀粉分解为可溶性的麦芽糖、葡萄糖 来自面条等的污垢 使用加酶洗衣粉时，应按产品包装说明上的要求，注意水温及衣物的纤维种类，达到既去污又不损伤衣物纤维的目的 纤维素酶 使纤维素水解为小分子 1.传统发酵技术 比较项目 果酒制作 果醋制作 腐乳制作 泡菜制作 菌种 酵母菌 醋酸菌 毛霉等微生物 乳酸菌 代谢类型 兼性厌氧型 需氧型 需氧型 厌氧型 原理 酵母菌无氧呼吸 醋酸菌有氧呼吸 多种微生物有氧呼吸 乳酸菌无氧呼吸 2.微生物的培养 (1)培养基 根据物理性质，分为液体、半固体和固体培养基。固体培养基主要用于微生物的分离、计数等；半固体培养基主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等；液体培养基用于工业生产。根据培养基的化学成分，分为合成培养基、天然培养基。根据培养基的用途，分为选择培养基、鉴别培养基等。如在筛选时，通常就要用选择培养基。 (2)无菌技术 此技术主要是为了防止外来杂菌的入侵，主要方法是消毒(较为温和的物理或化学方法)和灭菌(灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌)。 (3)分离与纯化 ①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 a.每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。 b.灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 c.每次划线从上一次划线末端开始，但划线时最后一区域不要与第一区域相连。 d.划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 注意　平板划线法适用于微生物的分离、纯化，但不能用于微生物的计数。 ②稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列浓度梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。 注意　稀释涂布平板法常用于活菌计数，而显微镜直接计数法不能区分菌的死活，只有通过染色才可以区别死活。用稀释涂布平板法进行计数时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 3.微生物的分离和计数 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①筛选菌株：利用选择培养基。 ②计数方法：统计菌落数、显微镜计数。 ③实验过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。 ④鉴定方法：尿素为唯一氮源的培养基(含酚红指示剂)→接种细菌。若指示剂变红，则初步鉴定该种细菌能够分解尿素。 (2)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理：纤维素酶是一种复合酶，在C1酶、CX酶的作用下，纤维素分解成纤维二糖，然后，在葡萄糖苷酶的作用下，纤维二糖分解为葡萄糖；刚果红与纤维素形成红色复合物，而不会与纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当只有以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红时，刚果红就可以与纤维素结合形成红色复合物；当纤维素被分解之后，刚果红—纤维素复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②操作流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。 ③鉴定方法：含纤维素的培养基(加入刚果红)→培养基为红色→接种某种菌→若培养基上形成的菌落周围出现透明圈→鉴定该种菌能够分解纤维素。 有利于细胞分裂，但细胞不分化 细胞既分裂，也分化 分化频率提高 有利于根的分化，抑制芽的形成 有利于芽的分化，抑制根的形成 促进愈伤组织的形成 (2)菊花的组织培养与月季的花药培养 菊花的组织培养流程：制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。 月季的花药培养流程：选材→材料消毒→接种和培养→鉴定和筛选→移栽→栽培。 5.酶的研究与应用 (1)酶在果汁生产中的作用 组成 作用 纤维素酶 C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶 纤