高速逆流色谱分离中药太子参中有效成分探究.pdfVIP

————————————————————堂垡兰竺生些皇垫些 高速逆流色谱分离中药太子参中有效成分研究 彭宝春襄黎明 字敏 艾萍 张嚷 (云南师范大学化学系昆明650092) 美蹙词高速逆流色谱太子参有效成分 由于高速逆流色谱具有两大突出优点：～是聚四氟乙烯管中的固定相不需要载体，因而消 除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象．特别适用于分离极性物质和具有生物活性的物 质【1,21；二是由于其分离方式与一般色谱不同，使其特别适用于制备性分离。最近的研究结果表 明：一台普通的高速逆流色谱仪一次进样可达几十毫升，～次可分离近lO g样品，因而，在80 年代后期被广泛地应用于植物化学成分的分离制各研究j…。 太子参为一传统的常用中药，具有补气益血，健脾生沣的功效。用于治病后体虚、肺虚咳 嗽、脾虚腹泻、小儿虚汗、心悸、口干、不思饮食。其化学成分主要是果糖、淀粉、皂甙。近来 有文献报道其中含有一定量的环肽，具有较好的生理活性，因此我们针对环肽应用高速逆流色谱 对太子参的部分化学成分进行了分离。 1实验部分 1．1仪器与试剂 为北京市新技术应用研究所研制)。硅胶薄层板(自制)。 1．2样品的处理 太子参7kg(购于昆明市菊花村药物批发市场)粉碎到20目，用95％的乙醇回流提取5次， 合并每次的提取液，用旋转蒸发器蒸发浓缩得棕褐色糊状物。然后用乙酸乙酯：水=l：l的溶 剂萃取，弃去水相，将z‘酸乙酯萃取液蒸发减压浓缩，得褐色提取物。 1．3HSocC溶荆系筑及分离操作 mol／L 溶剂系统：氯仿一甲醇-0．03 HCl(4：3：2)，上相为固定相，下相为移动相。取上褐色 提取物20 mL的溶剂系统(上相下相各l mL／min， nag，溶于2 mL)，用注射器进样。流动相流速2．00 ram／rain。 仪器转速800r／rain，检测器波长254咖，灵敏度范围lA，记录仪量程50mV，纸速4 2结果与讨论 我们先用圆形纸色谱和分配薄层色谱对各种溶剂分离系统针对太子参初提物进行了初选． 然后再在高速逆流色谱上进一步对初选的各种溶剂系统进行实验．最后得到满意的氯仿一甲醇一 0,03mol／L HC!(4：3：2)溶剂分离系统。使用前使两相溶剂系统在分液漏斗中充分振荡，让其两 相间彼此尽量饱和．然后再静置分层，取上相做固定相．下相做移动相。 有了好的溶剂系统，还需选好上机条件，使之在运动的螺旋管内达到蜀佳稳态分布，让固 定相保留达到最大并且稳定，否则，就得不到最佳分离效果。通过一定的实验魏们考察了一定综 合参数利牛下，两相溶剂分布与转速的关系，同时还考虑移动相流速对分离的影响，最后选择了 流动相流速ZOO mL／min，仪器转速800rlmin的分离条件。 取太子参初提物20 mL的溶剂系统(上相下相各l mg，溶于2 mL)，用注射器一次全部进样， 35rain后开始流出移动相，接着在色谱图上出现了分离较好的7个峰．我们按照图示在每个色 分析化学的成就与挑战 谱峰的最大值处收集一定量的被分离物。 将所收集的各个纽分在自制硅胶薄层板上点样．用氯仿·甲醇(8：2)为展开剂展开，咀碘蒸 气显色。结果表明各组分在TLC上皆显示一个单一的色谱点，并且峰5组分的色谱行为与标准 品太子参环肽B的色谱行为完全一致，可证明此组分为太子参环肽B。因此通过此分离方法一 次可得到7个单一的太子参的化学组分，其它峰所对应的化学成分结构正在鉴定中。 参考文献 1 袁黎明，傅若农，张天佑．国外分析仪器，1996，(3)：27 2 囊黎明，傅若农，张天佑．药物分析杂