黄连总碱的MS%2fMS和LC-MS%2fMS研究.pdfVIP

第21卷 质 谱 学 报 V01．2l 第3,4期 JOURNALoFCHINESEMASSSPBCrROMETRYSOCIETV N03，4 黄连总碱的MS／MS及LC-MS／MS研究 李立军再帕尔·阿不力孜项簧王爱国冯孝章 (中国医学科学院中国协和医科人学药物研究所，北京100050) 治疗糖尿病的中药复方中，黄连是其中一味，经药效学研究证明，其总生物碱为 有效部位，所含的多种生物碱中主要成分是小檗碱、棕榈碱、药根碱和黄连碱等。为 等各种质谱方法对由甲醇提取的总碱部分进行了分析研究。 1黄连总藏中主要成分的惦／№研究 Ultima-Tof串联质谱仪，分别对四个已知黄连生物碱：小檗 首先，运用AutoSpec 辨质谱对有关特征碎片离子的元素组成加以确认。四个已知黄连生物碱的结构如下： 小檗碱 棕榈碱 药根城 叭 一0 ——0CH。 一0H CH。 跎 一0’ 一0CH- 吗 一0c№ 盼 ——0CH。 一O 一0Cm 一OCm 艮 队 ——0CH。 —o：cH2 ——0CH， 一0CH 上述化合物中除黄连碱外，均为C．9、C．10位甲氧基取代，它们均可丢失C-9位 甲基，得到IM．CH，】+’离子，再脱去与N相连的H得到[M-CH】．离子，而[M-CH，】+’离 子继续失去相邻的另一个甲基，得到【M．2CH，】+离子。其中棕榈碱的[M-2CH，】+离子继 没有甲氧基，其主要发生丢失CO和CH20的裂解反应。 2黄连总碱中微量成分的MS／MS及LC-MS／M8研究 首先，进行了黄连总碱的ESl．MS谱测定，控制锥体电压为20V，得到各组分的分 子离子和少部分比较弱的碎片离子。通过高分辨质谱确定各组分离子的元素组成。对 81 一—广一_j孽翻岛魏譬瞬隋—j‘l麓j 第3，4期 黄连总碱的MS／MS及Lc—IlS朋s研究 各组分的分子离子分别测定了MS／MS谱。另外．利用LC—MS得到各组分的总离子流 色谱图，结合直接进样ESl-MS给出的分子量信息，并通过质量色谱图检测可能的分子 离子。为了确认各组分的分子量及其结构，采用LC-MS／MS方法对有关组分进行了CID 谱研究，提高了分析的选择性和准确性。由于黄连总碱中的小檗碱的比例较大．影响 其他成分的分析，故将大部分小檗碱通过柱层析分离出去．得到微量组分。 通过综合分析上述结果，分别得到其分子量为350．366，368，380，384的几个 微量成分，参照四个已知黄连生物碱的裂解规律，并结合这些微量成分的MS／MS谱， 推测出几个未知物的初步结构。其中分子量350的生物碱，定名为未知物。由于出现 明显的[M-CH3．H1+离子，则不应该是棕榈碱在c．5、C-6位变成双键的化合物，而与第 m／z290等离子均很 304和[M-2CH3-CHzOr 三个甲氧基裂解有关的[M-2CH3·CH．]+m／z 弱，另外参考甲基黄连碱的甲基是取代在C．13位，且C一13位基本上不发生失去甲基 的特征裂解，因此推测其甲基也可能取代在C．13位置。该化合物结构及其主要裂解方 式如下图所示。上述微量成分的摄终结构还有待于进一步确认。 M+(m／z