肌红蛋白(Mb)在DL-同型半胱氨酸自组装膜金电极(Hcy%2fAu)上电化学性质研究.pdfVIP

———— 壁塑些兰竺生些兰垫些 肌红蛋白(Mb)在圆吧．同型半胱氨酸自组装膜 金电极(Hcy／Au)上的电化学性质研究 张慧被李南强 (北京大学化学与分子工程学院北京100871) 关键词直接电化学肌红蛋白同型半胱氮酸自组装膜屯极 肌红蛋白是一种血红素蛋白质。虽然它具有电活性基团，在生物体内很容易披氧化或还原， 但是在常规电极上却很难得到这些化台物的电子转移。同型半胱氨酸是一种具有双功能团的分 子-它能促进蛋白质在电极表面的电子转移。本文在DL．同型半胱氮酸自组装膜电极上得到了肌 红蛋白的直接电化学响应。 1仪器和试剂 rrIIn M270恒电位仪及M270电化学系统(美国EGG，PAR公司)：三电极系统采用直径0．5 的金盘电极为工作电极，饱和甘汞电极(SCE)为参比电极．铂电极为对电极。D厶同型半胱氩酸 用水为石英亚沸3次重蒸水，试液用高纯氮除氧。所有实验均在室温(15℃±1℃)下进行。 2自组装电极的制备 把处理好韵金电极浸入除过氧的温度在30℃～37℃之间的100 mo儿Hey水溶液中 41h．取出后仔细用3次水冲洗以除去表面物理吸附的物质即可馊用。 3Mb在HcytAu电极上的电化学性质 由Fig．1可咀看出，Mb在裸金电极上没有峰，在Hcy／Au电极上却得到了一对峰形很好的Mb 8 8 的氧化还原峰，峰电位分别为n11lV*D-o．135V。取氧化峰和还原峰峰电位的平均值． V。在此电极上也得到了血红素和血红蛋白的类似的电化学 (艮十艮)，2，得式量电位P’为一0．012 行为．说明Mb的靴还原是分子中的血红素基团的氧化还原。峰电流随电极插入时间的延长而 增大并且峰电流的大小与扫速成正比，把在Mb液中扫过的HcyIAu电极取出，仔细用蒸馏水冲 洗后放入不舍Mb的缓冲溶液中扫描得到的Mb的 氧化还原峰屯流基本不变，且电极响应非常稳定， 放入超声波中超5rain后响应无变化。说明啪，的 电化学响应具有表面反应特征。q的存在除了使氧 化还原波的基线不～样外，对氧化还原峰没有影 响。固定屯极插入Mb溶液的时间为2mm所得到 的峰电流的大小与Mb的浓度在1．0×1一n10】几～ I．．．．．．．．．．．．1．．．．．．．．．。．．．．．．．、】．．．．．．．．．．．．．．．．，．．j1．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．I。．．．．-J 1 0×10_7 o．2 o．o—帕．2—o．4 mo儿范围内存在有线性关系． E(U) 线性方程为L=56．41+11．78C(L：nA； C：100 o)。 囝1肌红蛋白循环伏安囤 m01几；相关系数，=O．996 4M¨Icy／Au电极的制备 (5．O×1一∞l／L；D嘲．7t扫描速度100mV／s) 实线：№y／Au电极：虚线：裸露电板 把组装好的电极直接放入5．0x1矿mo儿的Mb 溶液中吸附0．5h即得到Mb．H吲Au电极。该电极 mol／L 于空白液中扫描与把组装好的电极直接插入5．0x10-。5Mb液中扫描得到的Mb的氧化还原 峰一样。 5求算电极表面Mb的覆盖度 电极的面积由裸电极在0．5 mollL的硫酸溶液中扫描所得的还原波的面积求得为 6 pH对Mb响应的影响