孤雌胚胎干细胞向肌腱样细胞诱导分化探究.pdfVIP

孱主鲨翌兰凳鐾监咝磐竺三盆￡墨星羔鐾 结论：O．5Hz／4％的周期性牵张应力可能是促进肌腱干细胞增值及胶原合成的最佳应力 刺激方式。 【关键词1：张应力；肌腱干细胞；增殖；胶原 孤雌胚胎干细胞向肌腱样细胞诱导分化研究 刘韦刘文光饶阳王阳阳陈富林 西北大学瑞捷组织I程实验室，西安市太白jE路229号’1∞69 目的：胚胎干细胞具有多向分化潜能，但在应用时存在一定的伦理道德问题。孤雌胚胎 干细胞(pESCs)是通过直接激活MII期卵子获得的，由于不能发育成个体，避免了 相应的社会问题。我们首先将孤雌胚胎干细胞诱导分化为间充质干细胞，进一步诱导 分化为肌腱样细胞，进行肌腱再造。 过体内植入检测pESCs的全能性。制各拟胚体，贴壁培养，获取pESCs来源的MSC， real．time PCR检测轴中胚层、脊索旁中胚层、问介中胚层、侧中胚层的细胞标志变化， R1砷CR检测上皮、肌肉、造血等标志，流式细胞术及免疫组织化学检测细胞表面抗 原。体外将其诱导分化为骨、软骨、脂肪并进行验证。将MSC进一步分化为肌腱样 细胞，接种于PLGAi维支架材料，进行肌腱再造。 在体内可以分化为三个胚层的细胞类型。随培养时间延长，胚外中胚层 及0c“表达降低，流式细胞术检测显示细胞大部分符合问充质干细胞特征，免疫组 线粒体、高尔基体增多，内质网高度扩张，细胞内出现丝状物，组织学染色及免疫组 化证实了细胞具有形成骨、软骨、脂肪的能力。向肌腱样细胞定 煞!i鲨型燮兰鐾拦些堂墨：銎盆￡墨星曼鐾 肌腱样细胞接种于PLGA材料上，激光共聚焦和扫描电镜观察显示细胞在材料表面贴 附良好，并能够稳定增殖，形成了肌腱样组织。 结论：pEScs可以分化为Msc，经定向诱导后可分化为肌腱样细胞，用于组织工程肌 腱再造。 【关键词】：孤雌胚胎干细胞：间充质干细胞：肌腱再造；PLGA；诱导分化 纤维环组织及细胞的区域差异性研究 型，刘晨1，过倩萍2，李斌1’2+ l苏炳大学gf}j|蓠第‘医院骨科，江苏省苏炳亩十椁街l号21sQ06 z苏强大学营’科研究所．江苏省苏炳市人民路7髓号2lS∞’ 目的：近年来通过组织工程方式构建仿生纤维环的研究逐渐受到重视。为此，需全面 了解该组织的微观结构、生化组成及力学特性。尽管已知纤维环组织沿径向不同区域 在细胞和基质组成方面差异明显，但仍缺乏详实数据。本研究拟提取兔椎间盘纤维环 外、中、内各区组织及细胞，鉴定它们之间在基质组分、细胞基因表达和力学性能等 方面的差异性，以作为纤维环不同区域表征的参考标准。 方法：将兔椎问盘纤维环组织分离为外、中和内三个区域，经胶原酶消化后获得的细 胞在含20％胎牛血清的培养液中培养。观察纤维环各区域的细胞形态；利用Real-Time PcR检测细胞基因表达；通过WestemBlot免疫印迹和免疫组化考察蛋白含量；通过纳 米压痕和细胞牵引力技术鉴别组织及细胞的力学性能。 结果：细胞形态学结果显示纤维环外区主要分布着类成纤维细胞，呈梭形，内区集中 分布着类软骨细胞，呈鹅卵石形或圆形，中区则具有内外层的混合细胞。Real．Time PCR、Westem I表达高，内区colII和 Blot和免疫组化分析结果均显示，外区Col Aggrecan表达高，中区则介于内外区之间。外、中、内区纤维环组织弹性模量呈递 减趋势。各区细胞的牵引力存在明显差异。 结论：椎间盘纤维环各区域所承担的生物学功能有所不同，其细胞类型、基质组成和 力学特性也具有明显差异。本研究通过定量、半定量或定性的方式系统考察了纤维环