ASIC1 a对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2014Aug；30(8)：1165—70 ·1165 · 网络 出版时间：2014-7—1016：51 网络 出版地址 ：http：／／www．enki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．0214．08．026．html ASICla对大鼠关节软骨细胞基质代谢及 MAPK信号通路表达的影响 张礼菊 ，胡 伟 ，唐 杰。，吴繁荣 ，葛金芳 ，陈飞虎。，吴建贤 (1．合肥市第一人民医院药学部，安徽 合肥 230032；2．安徽医科大学第二附属医院药学部， 安徽 合肥 230601；3．安徽 IK科大学药学院，安徽 合肥 230032) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．026 关键词：酸敏感离子通道 la；关节软骨细胞；基质代谢 ；丝裂 文献标志码 ：A 文章编号：1001—1978(2014)08—1165—06 原激活蛋白激酶；羟脯氨酸；糖胺聚糖 中国图书分类号：R-332；R322．72；R329．25；R684．3 摘要：目的 研究 ASICla(acid-sensingionchannella)对大 酸敏感离子通道 (acid—sesingionchannels， 鼠关节软骨细胞基质代谢及 MAPK信号通路表达 的影响。 ASICs)是一类由胞外酸化后被H 激活的阳离子通 方法 SD大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定，建立软骨细 道，ASICs通道开放可导致胞外 Na 、Ca“内流，并 胞ASIC1a表达沉默模型。将软骨细胞分为正常组 (pH 激发各种病理生理效应。其中，ASIC1a亚基因介导 7．4)、pH6．0酸化组、以及ASIC1a特异性阻滞剂 PcTx一1、表 ca 内流，并具有广泛的生物学功能和重要的病理 达沉默组和非特异性阻滞剂 Amiloride处理的酸化组，对二 学意义，成为研究的热点E1-2]。Xiong等 用特异 甲基亚甲蓝分光法检测大鼠关节软骨细胞培养上清中GAG 性阻滞剂Psalmotoxin．1(PcTx．1)阻断ASIC1a，发现 的含量，氯胺 T法检测 Hyp的含量 ，ELISA法检测 MMP-2、 其不仅特异性阻断由ASIC1a介导的电流，而且能特 TIMP-2的含量，Western blot法检测酸化及阻断ASICla后 异性抑制细胞内Ca 的超载，使脑缺血病灶模型的 ERK1／2、p38MAPK磷酸化 蛋 白的表达。结果 激 活 梗死体积明显减小，敲除ASIC1a基因或用 ASIC1a ASIC1a明显抑制大鼠关节软骨细胞 GAG、Hyp和TIMP-2代 谢水平(P0．O1)，对 MMP-2的代谢水平降低抑制作用较 阻滞剂都可以保护缺血性脑损伤。本课题组前期研 弱(P0．01)，且ASIC1a能引起ERK1／2、p38MAPK磷酸化 究证实，ASICs非特异性阻滞剂 Amilofide通过阻断 水平升高，阻断 ASIC1a后，磷酸化水平升高受到明显抑制 酸敏感离子通道减轻关节炎大 鼠关节软骨破坏，发 (P0．01)。结论 ASIC1a参与了酸诱导的大鼠关节软骨 挥关节软骨保护作用 J，但具体机制不清。 细胞基质代谢 的失衡 ，其机制可能与激活 ERK1／2和 p38 软骨是关节 内覆盖骨骼末端的无血管组织，由 MAPK磷酸化有关。 于低氧和缺血导致软骨处于一种偏酸性的生理状 态。关节软骨由软骨细胞