CKLF1通过激活PLCγFAK信号途径促进SH-SY5 Y细胞迁移.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2014Sep；30(9)：1209～13 ·1209 · 网络 出版时间：2014—8—711：40 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．2014．09．007．html ◇论 著◇ CKLF1通过激活 PLC~,／FAK信号途径促进 SH-SY5Y细胞迁移 王真真 ，苑玉和 ，韩 宁 ，张 毅 ，陈乃宏 (1．中国医学科学院神经科学中心，中国医学科学院 ·北京协和医学院药物研究所，天然药物活性物质与 功能国家重点实验室 北京 100050；2．北京中医药大学基础医学院解剖学教研室，北京 100029) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．09．007 于小分子的分泌蛋 白超家族 (Mr=8000—12000， 文献标志码：A 文章编号：1001—1978(2014)09—1209—05 含70～90个氨基酸)，是具有趋化作用的一类细胞 中国图书分类号 ：R322．81；R329．24；R392．11；R345．57 因子 ¨J，根据肽链N端高度保守的半胱氨酸残基的 摘要：目的 考察趋化素样因子 1(chemokine—likefactor1， 数量和相对位置的差异，可将趋化因子及其受体分 CKLF1)对神经系统细胞系SH—SY5Y细胞迁移运动的影响， 为4个亚家族：CXC、CC、C和CXCl2-4]，其中c代 并进一步研究其分子机制。方法 采用 CELLocate细胞定 表半胱氨酸，x代表任意一种氨基酸。趋化因子最 位法研究 CKLF1在不同时间点对 SH-SY5Y细胞迁移的影 初被认识是基于其调节免疫细胞游走的能力，深入 响；采用蛋 白免疫印迹法观察 CKLF1是否能够增强与细胞 的研究发现趋化因子的生物学功能不仅仅限于免疫 迁移密切相关 的局部粘着斑激酶 (focaladhesionkinase， 系统，在神经系统中也发挥了重要的作用，不但涉及 FAK)Tyr一397位点 的磷酸化水平，并进一步研究抑制 FAK 上游分子 PLC 对这一作用的影响；采用 Boyden趋化小室法 到神经炎症过程，还参与了神经系统中与炎症无关 观察抑制 FAK或PLc 对CKLF1趋化活性的影响。结果 的生理功能 。 CKLF1对SH—SY5Y细胞具有趋化作用，能够诱导其迁移运 趋化素样因子超家族 (chemokine—likefactorSU— 动，并能明显增强 FAK—pY397位点的磷酸化水平，而加入 perfamily，CKLFSF)是北京大学人类疾病基因研究 PLc 抑制剂U73122则减弱了CKLF1诱导的FAK磷酸化水 中心在国际上首次报道的一个新的基因家族 ， 平的升高。此外 ，FAK抑制剂 PF一573228和 PLC-,／抑制剂 该家族包括9个基因，其中趋化素样因子 1(chemo． U73122均可明显抑制 CKLF1的趋化活性。结论 趋化 因 kine—likefactor1，CKLF1；原名 UCK．1，U937derived 子CKLF1能够通过激活 PLC-,／／FAK信号途径，促进 SH— chemokine一1)是该家族中第一个发现的CC类趋化 SY5Y细胞的迁移运动。 因子 (GenBank编号：AF096895)¨。研究发现， CKLF1在 免疫 I1、造 血 ¨ 、骨骼 和 呼 关键词：CKLF1；细胞迁移；FAK；PLC~；CELLocate；SH—SY5Y