miR-181 a对乳腺癌耐药蛋白表达调控作用的研究.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2014Aug；30(8)：1073—8 ·1073 · 网络出版时间：2014-7—1016：51 网络 出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．008．html miR-181a对乳腺癌耐药蛋 白表达调控作用的研究 林 姝，焦旭阳，赵 琳 ，魏敏杰 (中国医科大学药学院药理学教研室，辽宁 沈阳 110001) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．008 纹分析法分离出的一种转运蛋 白，包含有 2．4kb 文献标志码：A 文章编号：1001—1978(2014)08—1073—06 mRNA翻译的655个氨基酸残基，含有 1个ATP结 中国图书 分类 号：R341；R342．2；R394．2；R737．902．2 ； 合域和 1个疏水性跨膜结构域，其基因定位于人染 R977．9 色体4q22E21。BCRP能够通过水解 ATP供能将转 摘要：目的 探讨 miRNA一181a对乳腺癌耐药蛋白(BCRP) 运底物 (化疗药物)从细胞 内逆浓度梯度泵到细胞 及其介导的乳腺癌细胞耐药性的调控作用。方法 应用生 外，特异性使乳腺癌细胞 内MX(米托蒽醌)、topote． 物信息学预测 BCRPmRNA一3UTR与 miR．181a的结合位 can(拓扑替康)等浓度下降，从而导致细胞对药物 点；荧光素酶报告分析检测 miR．181a与BCRPmRNA-3UTR 抵抗 ，诱导耐药性产生。研究发现，BCRP在乳腺癌 的结合作用 ；qRT-PCR和 Westernblot检测细胞中相关蛋白 表达水平。结果 与阴性转染组 比较，miR一181amimic与 MDR中发挥重要作用，在 MX、topotecan 等乳腺癌 PGL3一BCRP3UTR共转染后 ，荧光素酶活性 明显降低 (P 耐药细胞 中均发现 BCRP过表达 ；上调乳腺癌细胞 0．05)。miR-181amimic转染到 MCF7／MX细胞 48h后，与 中BCRP表达可诱导细胞对 tamoxifen(他莫昔芬)、 阴性转染组相比，导致原本 miR一181a低表达的MCF-7／MX BMS-554417(IGF一1Rinhibitor)等药物的耐药性 。 细胞中miR·181a的表达增加 (P0．05)，BCRPmRNA和蛋 乳腺癌患者BCRPmRNA水平与患者对于蒽环类抗 白表达明显下降(P0．05)，而MRP、P—gP、LRP的mRNA和 生素治疗的反应性相关 ，而且，BCRP是乳腺癌干细 蛋白水平均无明显改变(P0．05)；MCF-7细胞在miR-181a 胞的分子标记物之一_5J。因此，研究BCRP表达的 inhibitor转染48h后，与阴性转染组相比，miR一181a的表达 靶向调控机制对于影响乳腺癌MDR具有很重要的 降低(P0．05)。同时，BCRPmRNA和蛋 白表达明显增加 意义。 (P0．05)。而MRP、P·gP、LRP的mRNA和蛋白水平无 明 微小 RNA(microRNA，miRNA)是长度约 22nt 显改变 (P0．05)。结论 miR一181a可通过靶 向作用于 的内源性短链 RNA，通过与 目标 mRNA分子的3端 BCRPmRNA一3UTR区，调控 BCRP表达。 非编码区域 (3UTR)特异结合后，通过转录后调控