农杆菌介导海岛棉转化体系优化的研究.pdfVIP

中国麈擘c亟据 2015，31(3)：253—259 ChineseAgriculturalScienceBulletin 农杆菌介导海岛棉转化体系优化的研究 李 琼，李金花，舒文涛 (周 口市农业科学院，河南周 口466001) 摘 要：为建立高效规模化棉花转基因技术体系，解决棉花转化率受基因型限制、转化效率低 以及转化苗 畸形率高等问题。以棉花胚性愈伤组织作为受体，用农杆菌介导法将 基因导入海岛棉棉花品种 新‘ 海 l6号’，在提高海岛棉遗传转化效率的同时，建立了相对高效地转基因再生植株成苗技术体系。结果 表明：分3次依次继代于具头孢霉素浓度梯度的抗性愈伤增殖培养基，较3次均继代于含500mg／L头孢 霉素(ceO的抗性愈伤增殖培养基MS，抗性愈伤增殖速度较快。且60天添加 1次50mg／LKan时，转化 苗成苗率达到最大值。降低NI-L+／NOf水平对提高体胚发生率具有有效促进作用。选择继代90天后的 愈伤组织，胚状体诱导率可达到最大值 ；继代 180天 以上的愈伤组织可以摒弃。经转化后所获的子叶 形胚 ，具有较强再生能力，其产生的次生胚经再次培育出正常转基因植株这一途径可有效缩短转 周期。 关键词：棉花；遗传转化体 系；体细胞胚胎发生；转化周期 中图分类号：$562 文献标志码 ：A 论文编号 ：2014．1779 OptimizationofAgrobacterium。。mediatedTransformationSystem ofIslandCotton LiQiong，LiJinhua，ShuWentao (ZhoukouAcademyofAgriculturalScience，ZhoukouHenan466001) Abstract：Inordertoestablishan efficientandlarge-scalecottontransgenictechnologysystem tosolvethe problems，suchastheconversion ofcottongenotypesrestricted，low conversionefficiencyandtheconversion rateofseedlingsdeformitiesetc．，byusingtheagrobacterium—mediatedgenetransformationmethod，theBt genewasintroducedintoembryogeniccallusofxinhai16(XinjiangSeaIslandcotton)．Thestudyaimsto improveSeaIslandcottongenetictransformationefficiencyandestablisharelativelyefficientregenerationof transgenic plantsseedling technoloyg system．Theresultsshowed that：the callussubculture on callus proliferation resistantmedium containing cefotaxime，following three times，each subculture medium containingeephalosporinshadaconcentrationgradient，orwecould letcallussubculture3times，eachtime 畸 化 subculturecontaining500 mg／L cefotaximeresistantcallusproliferation medium MS2．Compraedwith the latter，thespeedofresistantcalluspro