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第25卷第4期 四川理工学院学报(自然科学版) Vol25 No4
2012年8月 JournalofSichuanUniversityofScience&Engineering(NaturalScienceEdition) Aug2012
文章编号:16731549(2012)04001704 DOI:10.3969/j.issn.16731549.2012.04.005
红霉素摇瓶发酵控制条件的优化
左 勇,李 杨,谢 晖,祁 峰,刘利平,张 晶
(四川理工学院生物工程学院,四川 自贡 643000)
摘 要:文章讨论摇瓶发酵控制条件对红霉素发酵水平的影响。通过单因素和正交实验优化,最佳
发酵条件为ABCD:前期发酵、中期和后期发酵三阶段发酵温度分别为31℃、33℃、29℃,发酵起始
1 2 2 2
pH值为67,摇床转速控制为:0~48h为220r/min,48~96h为300r/min,96~144h为220r/min,144
~168h为150r/min。优化后菌株UL5的发酵水平比优化前提高1554%。
关键词:红色糖多孢菌;摇瓶发酵;条件优化;正交实验
中图分类号:TQ465.5 文献标识码:A
红霉素是红色糖多孢菌产生的一种 14元大环内酯 1.2 培养基及培养条件
类碱性抗生素,是应用最广的大环内酯类抗生素之 改进高氏培养基:可溶性淀粉2%,NaCl005%,硝
[1]
一 。红霉素的生产主要采用发酵法,其发酵周期一般 酸钾01%,磷酸二氢钾005%,硫酸镁005%,硫酸亚
为6~7天,采用二级种子接种发酵,一级种子培养48 铁 0001%,重铬酸钾 (70~80 g/mL),青霉素
μ
h,二级种子培养36~48h。 (25~3 g/mL),琼脂15~25%,pH74~76(NaOH
μ
我国红霉素发酵水平属低水平重复操作,与发达国 调)。33℃培养168h。
家相比差距较大,目前国外发酵单位已达8000 g/mL 改进斜面培养基:可溶性淀粉 1%,硫酸铵03%,
μ
以上,而国内大多企业红霉素发酵水平却一直在4000 玉米浆 12%,NaCl03%,碳酸钙 03%,琼脂 15~
[2]
~5000 g/mL 。红霉素发酵水平主要受工作菌种、 25%,重铬酸钾(70~80 g/mL),青霉素(25~3 g/mL),
μ μ μ
培养基组成、发酵条件的控制以及后期的分离提纯条件 pH75(NaOH调)。33℃培养168h。
[3]
等多方面因素的影响 。由于国外企业对红霉素生产 种子培养基:淀粉30%,黄豆饼粉25%,蛋白胨
进行技术封锁,而国内红霉素生产的发酵水平一直比较 05%,糊精 30%,葡萄糖 10%,NaCl04%,硫酸铵
落后,因此,目前国内很多科技工作者从红霉素发酵相 075%,碳酸钙 06%,硫酸镁 0025%,磷酸二氢钾
关参数和调控入手,希望提高红霉素发酵水平[4]。根据 002%,pH75(NaOH调)。挖取新鲜活化菌种平板
这些情况,本研究拟通过对摇瓶发酵过程中的温度、摇 (1cm×2cm)接到装有50mL种
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