不同MBL基因型在抗绵羊支原体肺炎中TNF-α变化分析.pdfVIP

·场州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·403· 不同MBL基因型在抗绵羊支原体肺炎中 TNF—O(的变化分析 张慧，赵凤，余鹏，班谦，赵宗胜 (石河子大学动物科技学院，新疆石河子832003) 引曹 绵羊支原体肺炎是由绵羊肺炎支原体引起的一种慢性呼吸道传染病，从抗病育种的角度对绵羊支原体肺炎的 leetin，MBL)是机体天然免疫系统的重要组成部分，参 防治已成为研究热点。甘露(聚)糖结合凝集素(Mannan—binding 与构成抗感染第一道防线。血清MBL水平低下导致免疫调理功能缺损，使机体内抗炎因子发生免疫应答变化，最终 导致感染性疾病。肿瘤坏死因子-Ct是机体免疫防御、炎症损伤、体克等发病的重要介质。经前期研究，支原体肺炎 越严重，肿瘤坏死因子升高越显著。因此，本实验在前期研究的基础上，利用人工攻毒的方法检测了不同MBL型个 体在绵羊支原体肺炎感染过程中TNF-吨的免疫应答变化，为探讨绵羊支原体肺炎的抗病机理提供科学依据。 材料与方法 选择健康的2月龄中国美利奴羊，25只作为试验组，5只作为对照组；首先进行绵羊支原体肺炎ELISA血清学 I、Ⅱ、 检测，确保羊群健康；根据测序结果设计24对SSCP引物，对MBL基因外显子l进行多态分析．分为MBL Ⅲ、Ⅳ型；并进行血清MBL检测，分成高中低三个组，建立供试群体，实验组接种2ml／只绵羊肺炎支原体标准菌株 Y一98．对照组注射相同量灭菌生理盐水。分别在攻毒前一天、攻毒后一天、一周、两周、三周采集绵羊新鲜的抗凝血 并分离血清。用ELISA试剂盒检测TNF吨水平。所有数据均用SPSS13．0统计学软件进行单因素方差分析，试验数 据采用平均数±标准差表示。 结果 MBL 毒后两周。MBLI型显著高于MBLlI型，且显著高于正常对照组。 讨论 寰1 不同凇￡基因型在不同时问段TNF吨的表达变化 本研究利用人工感染 的方法．初步证实了筛选 出的不同肘脱基因型对 绵羊支原体肺炎有不同的 抗性能力．可能因为MBL 多态性导致血清MBL浓 度发生改变。从而使活化 注：罔列中肩注字母不同者为盖异显著(PO．05)．不泣者为盖异不正著(P0．05) 补体和调理吞噬功能减 弱，进而导致TNF吨发生变化，MBLIV型在攻毒后一周TNF一仅浓度达到峰值。这与其血清中低MBL浓度相关，由 于低MBL导致机体免疫力低下．支原体肺炎严重化，从而使TNF—d含量显著升高。因此深入探讨MBL对免疫应答 的调节作用机理将有待于迸一步研究。 关键词：枷L；绵羊支原体肺炎；免疫应答；TNF-n 致谢：本研究由国家自然科学基金“绵羊甘露聚糖结合凝集素基因与支原体肺炎的相关性研究”(项目编号： 资助。 o通讯作者。E—mail：zhaozongsh@shzu．edu．cn。