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456 02011年学术年会 T030098 PPV河南流行株的分离鉴定及部分理化和免疫学特性研究 顾 帅王川庆赵军 陈 陆王新卫杨 霞常洪涛 (河南农业大学，河南郑州450002) 目的 为了解流行于河南地区猪细小病毒病的地方毒株的生物学特性，进而为今后猪细小病毒病的控制提 供技术参考，笔者在近年来采集发生母猪流产猪场的疑似病料进行病毒分离，并对分离获得的病毒进行 了部分生物学特性研究，现报告如下。 材料方法 将采集的疑似病料处理后接种长满单层的PK一15细胞，观察细胞病变，同时利用血凝和血凝抑制试 验以及问接免疫荧光试验鉴定分离病毒，并进一步用PCR方法扩增基因和序列分析进行鉴定；对鉴定的 病毒，进行乙醚、胰酶、热、酸敏感性试验以及免疫原性检测。 结果 从河南多个无关联、发生母猪流产的猪场所采集的流产、死胎病料中分离T4株猪细小病毒，分别 病毒灭活后制成油乳疫苗免疫豚鼠后可诱导豚鼠产生的血凝抑制抗体滴度高达210以上，免疫后12w抗体 滴度仍能维持较高水平。 讨论 本试验从河南省部分猪场发生繁殖障碍的母猪所产的流产胎儿、死胎、木乃伊胎、弱仔和死亡新生 仔猪病料中分离到4株PPV，说明河南地区仍有猪细小病毒病发生和流行。这些毒株也为该地区PPV的 变异研究和疫苗研制提供了可靠的试验材料。对其中有代表性的HNZK一1株的部分培养特性、理化特性 的检测显示其拥有细小病毒共同的特征。以该株为抗原制备的灭活油乳疫苗免疫豚鼠后，豚鼠能产生高 滴度长时间的血凝抑制抗体；与市售疫苗相比，HNZK-1株制灭活油乳疫苗能够诱导更高的血凝抑制抗 体水平和更长的免疫时间，证明其具有良好的免疫原性，可作为猪细小病毒灭活疫苗的候选毒株用于该 病的防控。此外，在测定PPV的TCID50时，因有些胎牛或成年牛血清中含有PPV生长抑制因子，含有该 血清的细胞培养液会影响PPV增殖，PPV的复制开始也需要细胞源性DNA聚合酶，故笔者采用无血清培 养基传代并同步接毒的方法，最大限度减少的血清对细小病毒生长的抑制。结果显示，同步接毒的细胞 培养物有着更高的HA价。这对生产实践也具有指导意义。 参考文献 VW．Porcine inWestern Vet．1972，48：536-540． 【l】CoacldeyW,Smim parvovirus Australia[J]．Aust PA．Porcine infectioninvitro：A modelforthe of [2】Bachmann parvovirus study replication different Soc Biol temperatures[J]．ProcExp Med．1972，140：1369-1374．