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园 艺学报2011，38(增刊)：2546 http：／／㈣ahs．ac．cn
HorticulturaeSinica 26．com
Acta E—mail：yuanyixuebao@1
异性
张扬勇，方智远+，王庆彪，刘玉梅，杨丽梅，庄 木，孙培田
(中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081)
oleracea
甘蓝种(BrassicaL．)包含形态变异丰富的栽培变种，如结球甘蓝、青花菜、花椰菜、
球茎甘蓝、芥蓝、抱子甘蓝、羽衣甘蓝。相对于细胞核DNA，叶绿体DNA具有母性遗传、单倍性
和高度保守性的特点，已被广泛用于物种进化、系统发育等方面的研究。前人对甘蓝种内的叶绿体
DNA多态性开展了一些研究，但均没有获得在不同栽培变种间或变种内的多态性。因此，开展甘蓝
叶绿体DNA多态性研究对于阐明甘蓝不同变种的起源进化及其亲缘关系具有重要意义。
以甘蓝种内7个栽培变种的203份材料为试材，利用张扬勇等开发的32对叶绿体SSR引物，
检测不同栽培变种的叶绿体DNA多态性。以结球甘蓝、青花菜、花椰菜、球茎甘蓝、芥蓝等5个
变种各两份材料进行叶绿体DNA多态性的初步筛选，获得的叶绿体单核苷酸多态性(SNP)位点利
利用转化的dCAPS标记对其余193份材料进行多态性及变种特异性验证。
在8％聚丙烯酰胺凝胶电泳上，没有发现32个叶绿体SSR引物在不同变种间扩增产物的多态性。
记——ACP43．93G／C，表明甘蓝叶绿体DNA多态性水平相对较低。该标记初步呈现变种特异性，
即在两份花椰菜和两份青花菜中为93C，而在两份结球甘蓝、两份芥蓝、两份球茎甘蓝中为93G。
的突变，使得在SNP位点处产生了限制性内切酶RsaI的识别位点(．GTAC．)，将该SNP位点成功
Rsa
转化为dCAPS标记——ACP43．93I。利用该dCAPS标记进行其余193份材料间的多态性验证，
发现在全部64份花椰菜和大多数(44份中的39份)青花菜材料中表现为226
bp单元型，而5份
青花菜和其余5个变种材料中表现为264
bp单元型，进一步表明该SNP标记具有变种特异性。
本研究首次获得的甘蓝不同栽培变种间的SNP位点，表明在不同变种间存在叶绿体DNA的多
态性，同时为支持青花菜和花椰菜亲缘关系较近的观点提供了一个叶绿体DNA证据，也可为今后
分析甘蓝种内不同变种的进化顺序提供细胞质DNA方面的依据。
关键词：甘蓝；不同变种；叶绿体；SNP标记；dCAPS标记
中图分类号：S635．1 文献标识码：A 文章编号：0513—353X(2011)S．2546-01
收稿日期：201l一08一Ol
菜产业技术体系项日(CARS-25)
‘通信作者(E-maih曲卸∞喇鱼塌越m嚏∞：Tel：010
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