核酸-铟(Ⅲ)-8-羟基喹啉三元荧光体系的研究和应用.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年10月 JOURNAI，OFGUANGXINORMALUNIVERSITY V01．21No．2 核酸一铟(Ⅲ)一8一羟基喹啉三元荧光 体系的研究与应用 林旭聪，林晓莉，林坚，郭良洽，谢增鸿。 (福州大学化学化工学院．福建福州350002) 具有特定电子结构的M”离子与N，0配位配体络合可形成八面体结构，与核酸结合产生能量传递， 是核酸研究的重要工具‘“．近来，M”离子核酸荧光探针发展较快，主要为铝、钪、铽等离子配合物…“．铟 (山)离子电子结构次外层f电子全空，能与8HQI．形成I。。一L型配合物，与核酸结合形成三元荧光增强 体系，可用于核酸的测定．其研究应用尚未见报道．本文研究了核酸铟(LⅡ)一8羟基喹啉三元体系的荧光 特性，建立了一种新的核酸测定方法． 1实验部分 DNA fsDNA(上海)，鲑鱼DNAsmDNA(北京)，酵母RNA 海)．缓冲液：Tris—HCl，pH=7．50． 2结果与讨论 2．1光谱研究 如图1所示，pH7．50、激发波长为365 nm，522nm，后者发射波长红 喹啉中分别加入核酸、铟(IⅡ)离子，荧光强度明显增强，荧光发射波长为516 移6 ilm(曲 线1)． NA)，7 68(fsDNA)，8．36(smDNA)，7．27(yRNA)；现分别为1．46，1 (smDNA)，1．50(yRNA)，三元体系的荧光寿命增强． 2．2条件优化 2．2．1酸度影响 当pH—j．004 00时，体系荧光强度 =7．00～8．00时，体系荧光强度较为稳定，并在pH--7．jo时达到最大；pH值大于8 随着碱性增强而降低． 基金项目：教育部“高等学校骨干教师资助计划”项目；福州大学资助项目 960一)．男，教授E—mail：zhxie@fzueducn 作者简介：谢增鸿(1 广西师范大学学报(自然科学版) 第21卷 2．2．2试剂加入顺序 考察6种加入顺序对荧光体系的影响，结果表明，游 离铟(山)会与核酸结合而导致三元体系荧光强度降低． 试剂最佳加入顺序为核酸一8一羟基喹啉一铟(Lift)一缓冲溶 液． 2．2．3 8一羟基喹啉铟(ⅡI)浓度影响 8一HQI，／In为3．0时，核酸对体系的荧光增强作用最 大，8HQI．／In达到最佳配比；当8一HQI，／In大于3．5时， 铟离子较少，8一HQI．一In(IJl)荧光强度较小；当8一HQI。／In 小于2．5时，铟离子与核酸相结合，三元荧光体系荧光强 度降低． 图1荧光发射光谱(pH7．50) 2．2．4离子强度和乙醇含量的影响 1．8-HQL3 5×10。mol／LctDNAl0 5× mg／L．In(1)2 当离子强度小于0．10时，离子强度对三元体系不影 105[110I／L．28HQI，35×101nloI／L．1n(■)25X10～ 响；当I0．10时，随着离子强度的增加，体系荧光增强nloIVL．38-HQI．35×lo。nml／LctDNAl0 8一