宫颈癌端粒酶活性检测.pdfVIP

中国癌症研究进展@ 宫颈癌端粒酶活性的检测 孙树芬卢林宋默琴谢佐福黄书华 性核苷酸重复序列(Tr(脚)n。这一发现为端粒现代研究的开始。90年代以来，国内外生 物学家注意到端粒酶与肿瘤的关系。1994年Kim等u1首创了高度敏感的端粒重复序列扩增 了检测人端粒酶活性(telome 癌(cervicalcarcinoma，CC)组织中的表达情况。 材料与方法 1．标本来源1999年上半年我院妇科门诊临床诊断为宫颈癌者31例，宫颈炎ll例，取宫 颈活组织做病理和端粒酶检查。按F／GO临床分期标准【3J，原位癌1例，授润癌30例；浸润癌瑚 1例，脚20例，Ⅲ期9倒。鳞癌28例，腺癌2例，鳞腺癌1例。新鲜标本立即置一80℃冻存。 2．试剂Telomerase Mannkeim公司。 PCR-ELISA检测试剂盒购于Boe-hringer 3．方法按PCR-ELISA试剂盒说明书的方法进行。 (1)肿瘤组织抽提物的制备：组织在冰上切碎加入裂解液，置冰上30min后离心，取上清液 即为组织抽提液。 (2)端粒酶扩增：组织抽提物加反应混合液进行PCR扩增。 (3)变性与杂变：PCR扩增产物加变性液使DNA解旋变性，再加杂交液进行杂交。 规步骤进行操作，最后测定每孔A值。每次实验均设有阳性对照及阴性对照，阳性对照 A值0．2为阳性。 4．统计学处理将所有资料输入计算机，运用SPSS软件进行统计分析。 结 果 17例，2者1l倒，3者3例(表1)。 作者单位：350014福州，福建省肿瘤医院 官颈癌蜡粒酶活性的检滔 囊1 0c组织与富颈炎组织中端粒酶活性表达情况 注：P0．05 (2者2例、3者1例，表2)。 裹2靖粒酶活性与癌组织分化程度的关系 (2者5例、3者1例，表3)。 裹3端粒酶活性与临床分期的关系 讨 论 价格昂贵、有放射线损害，且只能定性。目前采用PCR-ELISA法检测肿瘤细胞中端粒酶活 性。操作简便、敏感、可半定量，通过端粒酶A值的高低对肿瘤恶性程度及预后进行判断，也可 作为肿瘤标记物(tunH 临床分期有明显关系。 ‘ 刘兴坤【41总结近年来文献报道的各类肿瘤端粒酶活性表达的百分比，说明端粒酶几乎在 中国癌症研究进展。 者。用棉拭子从15例癌症患者和19例癌前期患者采集的标本中发现了端粒酶，而33例健康 10％，差异有显著性(PO．05)。说明0C组织中有端粒酶存在，阳性率与其他学者报道相似。 官颈炎，对此例又做了二次宫颈活检，均为宫颈炎，未行放疗出院。对该患者有追踪随访的必 要，如以后病理确诊为CC，将说明端粒酶在肿瘤的早期表达。还有1例门诊诊断为宫颈炎，而 病理诊断是宫颈鳞状上皮原位瘟累及腺体，端粒酶A值3．415，为特强阳性。这种端粒酶活性 与病理诊断同步的现象提示，端粒酶活性检测可作为CC的又一项诊断指标。 Mutirangura等怕1报道了端粒酶活性在OCHPV阳性和HPV阴性组织中的表达情况，指 表明随着eC恶性程度增加，端粒酶活性进行性增加。端粒酶表达在OC发展中起着重要作 用。本组研究了端粒酶活性与CC组织分化程度及临床分期的关系，端粒酶A值的高低与组 织分化程度及临床分期有关，差异有显著性(P0．05)。恶性度高的低分化癌及临床晚期患 者A值明显增高。提示端粒酶与肿瘤的发生发展有关。端粒酶活性的检测是除病理诊断之 外的又一项有意义的诊断指标。它可作为一项肿瘤标记物进行OC的诊断、鉴别诊断。并可用 于预测患者的预后。奉组因例数较少，无法进行肿瘤病理类型如鳞癌、腺癌方面端粒酶活性分 析，此工作有待今后进一步研究。 参考文献 1 KilnNW，Pjat础MA，ProwseKR甜甜．Specific