非小细胞未分化肺癌ras-p21荧光测定及其和术后预防性放射治疗的关系.pdfVIP

彝小细胞未分化肺癌髓-p21荧光测定及其与术后预防性放射治疗的关系499 非小细胞未分化肺癌ras-p21荧光测定 及其与术后预防性放射治疗的关系 张红星吕 宁郭蕾王顺宝 分子生物学研究证明，正常细胞中原癌基因变异，导致细胞正常增殖和分化紊乱，引起细 胞恶变。最终形成癌瘤。与肺癌相关的原癌基因已发现多种，具有同源碱基序列的K—r∞、H- r∞、和N．rss的r∞族基因活化，主要见于非小细胞型肺癌。其突变检出率约3096，表现为* 白表达，分析与术后局部预防性放疗关系。 材料与方法 (一J临床资料 断鳞癌23例，腺癌13例，腺鳞癌3例。术后2周内信封法随机分为单一手术或术后放疗组。 放疗组病例在分组后2周内开始照射。6MVX射线，照射野范围为全纵隔和气管切缘，前后 对穿Dt40Gy后，双倜水平野推量Dr20Gy，总剂量Dr60Gy／6周，共30次。 (二)测定方法 erllX0．3cm×0．3cm经福尔马林固定的手术切除肺癌组织块，剪 1．标本制备①取O．3 min 碎。用100％、95％、70％、50％酒精梯度水化，处理10min，弃上清，加3“双蒸水，3～5 ml ooO 后弃上清。②加1 PI玛，用组织匀浆器研磨成单细胞悬液，PBS洗2次。2r／rain， 2～3 min。弃上清。取细胞1×106／ml200目尼龙网过筛。 Cruz 2．抗体作用①一抗与二抗：一抗是小鼠单抗C-H．r∞(Fz3s)(SantaBioteehnolo科 lmmunoresearch 抗为Fr-IC荧光标记抗鼠IgG(Jackson 舍抗非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。②加50出的0．15旭／100出一抗于上述细胞中，再加人 ③iJn50 m的2．25Ug／100出二抗于经一抗作用过的细胞中，再加人含0．5％牛血清白蛋白的 PBS50 h内荧光测定。 m，3713孵育30min，用PBS洗2次，弃上清，413保存，24 3．荧光测定①样品用FACScan流式细胞仪(北京医科大学流式细胞仪室提供)测定。 激发光488 nln，计算各样品的F1值。 llnl，发射光530--535 柞者单位：100621北京．中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院 中国癌症研兜进展o H值；疸堑此卑镧群鬻器鬻麓警丝逖 照用正常人的淋巴细胞不加一抗。 ‘ l三)统计方法 统计学处理用f检验，生存率为卡一迈曲线。 结 果 95％。均未行化疗。 治疗方式的存活曲线见图1，2。表达阳性病例，术后放疗组中42．9％(3／7)野内复发，而阴性 围1肺癌患者ra争pZl阳性 圈2肺癌患者rubp21阴性 不同诒疗方式2年存话曲线 不同诒疗方式2年存活曲线 讨 论 研究证明r∞基因激活与多种癌症有关，只是程度不一L2J。与肺癌相关研究主要集中于K-ra8 与肺癌关系的报道尚未见到。我们研究发现，H-ras p2l表达率较K-ras略高。虽然全组病例 的肺癌生物行为和2年存活率同ra8-p21表达无关，但表达阴性病例术后放疗组局部控铜率比 单一手术组高18％，2年存活率高33％。阳性病例术后