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惜配修复基因mRNA在肺癌组织中的表达 错配修复基因mRNA在肺癌组织中的表达 陈国安刘天菊孙燕李申德 人类DNA错配修复(mismatch 关12j2。MMR基因功能缺陷是遗传不稳定或微卫星不稳定(mierosatellite mRNA在肺癌组织中的表达状态及其与MSI的关系。 材料与方法 (一)组织标本 46例原发性肺癌及相应的远离癌组织的正常肺组织，均经病理确诊。标本取自中国医学 科学院肿瘤医院(1997年3--5月)，术后1～3h内获得，一70℃保存。鳞癌23例，腺癌19例， 腺鳞癌3倒，小细胞癌1例。年龄36～7l岁。术前均未做过放疗或化疗；按TNM分期，均 为I～ⅢA期。 (二)错配修复基因nfllNA表达检测 序列见表1。 逆转录酶逆转录合成eDNA。30mPCR反应体系，MMR基因上下游引物各20pmol，循环如 下：变性94℃30s，退火50--60℃30s，延伸72℃50s，共28个循环，最后72℃延伸7min。 3，琼脂糖凝胶电泳厦先密度薄层扫描取PCR产物6m行1．5％琼脂糖凝胶电泳。然后 光密度薄层扫描，以p-aetin或＆．MG为内参，比较同一患者的癌组织和相应正常肺组织的光 密度比值，若正常组织／内参：癌组织／内参≥2，则认为癌组织mRNA表达降低【4J。 本课题受国家自然科学基金项目资助(基金编号 作者单位：710004西安医科大学第二附属医院呼吸科(陈国安刘天菊)；中国医学科学院肿瘤医院(孙燕 李申德) 中国癌症研究进展。 裹1错配修复基因mRNA裹选所用引韵 基因 啪删57叫) ，器 退火温度(℃) s嘶 卯 hMSH2篙鬻翟嚣 IIⅦ卸AO鼬嘭呲瓢℃cAG蝴622622 ∞ 啪肌硼m㈣AATKACc AAGCl【xjrcl(册AAAAGcG 如 GC自0c4GC^Tcc^aGG^G ㈣Ta瑚∽AGI姒拊珊GGAAA359 ：2 A!口3GA GAAOc0口℃AGAAl℃C 28 舒 288 hMSI酶O[rKAG(℃A(’￡舢蚺G地GCA }1脚印僦A盯I℃C∽煳 GA触叽杖邢附蜘比A11c 垂actin* 300。” 鼹 GAAGC㈣TGGAGGAT 8，．MG AaⅫ嘣蕊AA蛐㈣ 120 斯 ‘。 ^1YVrl’rAAArY’rrrAl丫：A1Y： (三)微卫星DNA检测 学处理用x2检验。 结 果 mRNA降低者较多，分别为32．6％ 正常肺组织降低率为13％～32．6％，hMSH2和hMLHl 学差异。单个基因mRNA表达与肺癌临床病理及预后无明显相关性。 o．005)，说明mRNA表达下调与MSI和(或)L