参元丹中丹参素的测定和药物代谢动力学研究.pdfVIP

第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 参元丹中丹参素的测定及药物代谢动力学研究 尚菊菊1 吴宝1 李爱勇1 刘红旭1 解欣然2 1．首都医科大学附属北京中医医院(北京，100010) 2．北京市中医研究所(北京，100010) 益气养阴、破血逐瘀组方的参元丹(SYD)是北京中医医院的院内制剂，既往的实验研究表明其临床 治疗不稳定心绞痛(血瘀证)临床综合疗效总有效率在87．1％。91．3％。本实验研究测定其主要组成成分丹参 素及其药代动力学，为其临床应用提供理论支持。 l材料与方法 1．1材料： 仪器：岛津Lc一9A高效液相色谱仪，G1311A-四元泵，SPD-6AV可变波长检测器，CBM一102化学工作站。 试剂：甲醇、乙腈，超纯水，冰醋酸、乙酸乙酯，丹参素钠对照品(中国药品生物制品检定所)，对羟基苯 甲酸，三氯醋酸，参元丹药液(取参元丹胶囊适量，加蒸馏水配制成浓度0．0969·ml。1药液)。 2009—0007。 1．2色谱条件 KromasilC184．6ram×250mm，5 lam色谱柱，预柱为Agilent 为1．0mL·min～，检测波长为280nto，室温。 1．3标准曲线的绘制 1-3．1标准贮备液配制：精密称取5．0mg丹参素钠于5mL容量瓶中，用1％醋酸定容至刻度，然后取适量用1％醋酸 mg对羟基苯甲酸于lOmL容量瓶中，用1％醋酸稀释 稀释成浓度为7个不同的丹参素钠标准溶液。另精密称取4．0 至刻度。 1．3．2标准曲线的制备 II IlL， L，内标溶液对羟基苯甲酸10 精密量取空白血清样品1．0mL，加入不同浓度的丹参素钠标准溶液50 10％三氯醋酸溶液200uL，按1．3．1方法进行处理与测定。以丹参素与内标物的峰面积比值(Y)为纵坐标，丹参 素浓度(X)为横坐标，用最／j、--乘法进行线性回归。 1．4给药方案与样品采集 373 第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 h禁食。除空白组大鼠外，各 Wistar大鼠随机分成3组，每组11只(即相同的取血时间点共3只)，实验前12 水浴温孵30rain后，离一心lOmin，分离血清。 1．5血清样品的处理与测定 取血清样品1．0ⅡlL，加入1％醋酸50pL，内标溶液10p IlL，混旋、离心。上清液 L，10％--氯醋酸溶液200 用乙酸乙酯旋涡混合萃取2次，每次1．5ml，提取时间2min，再离-b2min，分取乙酸乙酯层，于45。C水浴上通 ll N2流挥干。临用前残渣用流动相100 min，取上清液20u L溶解，超声、涡旋混合各lmin，离-blO L进样，以内 标工作曲线法求算丹参素的血药浓度。 2结果 2．1色谱行为及专一性 丹参素与血浆内源性物质、参元丹吸收入血的其他成分或代谢产物色谱峰均达到基线分离，丹参素的保留 时间约为7．6min，结果见图l。 一 O SO 2O 1O 00 A空白血清