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单头二龄幼虫的微量DNA中扩增出大豆胞囊线虫的SCAR特异性片段,敏感性
非常高,达到单条幼虫的水平。这表明本研究研制的PCR鉴定法可用于生产实
践中大豆孢囊线虫的快速灵敏的检测和鉴定。
甘薯茎线虫的核糖体DNA基因遗传多态性初步研究
杨玉文1’2,彭德良1
(1中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100094
2中国农业科学院研究生院,北京100081)
起戎草茎线虫(D.幽瑚cf)和噬菌丝茎线虫。有重要经济重要性和引起农作物严重
损失的茎线虫是危害甘薯的茎线虫和危害大蒜及球茎和鳞茎类的起戎草茎线虫。
茎线虫对我国甘薯上的危害最为突出和明显,该线虫病在我国河北卢龙县、昌
黎、滦县、迁安、廊坊、霸州、曲阳县、定州等21个县市,北京密云、大兴、房
山、河南许昌、郑州、平顶山、郏县、山东沂水县、江苏徐州等省市发生普遍和
严重,主要侵染甘薯的地下部根、块根和块茎,被害部分表现为组织坏死、干缩、
糠心和表皮变褐龟裂,俗称甘薯糠腐茎线虫病,该病一般减产20%~30%,严重者
40-50%,甚至绝产,我国华北和华东甘薯的毁灭性线虫病害,严重制约了甘薯产
业的发展。我国甘薯茎线虫病的病原,20世纪80年代以前,曾鉴定为起戎草茎线
虫(Ditylenchusdipsaci),1983国内学者对河北和山东两个甘薯茎线虫病标样进行
了研究,将甘薯茎线虫病病原重新订正为马铃薯腐烂茎线虫(Ditylenchus
destructor),而对我国其它地区甘薯茎线虫病病原并未深入详细研究,目前我国
甘薯茎线虫病的病原一致笼统沿用马铃薯腐烂茎线虫。
本文用光学显微镜和扫描电镜对我国北京、河北、山东、江苏、安徽等5
个省市不同地区的甘薯茎线虫群体进行了形态学,对其主要形态特征进行了描述
和数值测计,结果表明:我国Ⅱ型甘薯茎线虫的形态测计值和主要形态特征与
destructor)基本一致。
腐烂茎线虫(Ditylenchus
用RFLP.PCR技术研究了我国5个省市10个不同地区的甘薯茎线虫群体的
核糖体DNA-ITS基因遗传多态性,用通用引物rDl认1/rDM屹扩增北京大兴、
河北卢龙、河北抚宁、河北易县、河北滦县、河北滦南、山东平阴、安徽泗县等
区域均产生了约900bp的片段,而山东沂水、江苏铜山等2个地区的甘薯茎线虫
14种限制性内切酶进行rDNA.ITS.RFLP分析,
群体扩增出约1200bp的片段。
结果显示:我国北京大兴、河北卢龙、河北抚宁、河北易县、河北滦县、河北滦
南、山东平阴、安徽泗县等地8个甘薯茎线虫群体均产生了相同的酶切谱带,而
山东沂水、江苏铜山甘薯茎线虫群体的酶切图谱与上述8个甘薯茎线虫群体的酶
谱带存在较大的差异。因此将我国d玎8个甘薯茎线虫群体称为I型甘薯茎线虫,
而山东沂水、江苏铜山甘薯茎线虫群体称为Il型甘薯茎线虫。经彳缸l、Rsal酶
eta1.
切可以区分山东沂水和江苏铜山的线虫群体。将本研究的结果同Wendt
(1993)的酶切结果比较发现:山东沂水、江苏铜山Ⅱ型甘薯茎线虫与国外腐
烂茎线虫(Ditylenchusdestructor)酶切谱类似,但是也存在一定的差异。
应用TaqMan-MGB探针进行松材线虫的实时荧光
定量检测技术研究
葛建军1,曹爱新1,刘先宝2,陈长法3
(1中国检验检验科学研究院,北京100029,2华南热带农业大学,海南571737;
3山东出入境检验检疫局,山东266002)
松材线虫是国际公认的最重要的检疫性有害生物之一,也是我国2类检疫危
险性有害生物,我国口岸多次从货物的木质包装中截获该线虫。由于松材线虫与
拟松材线虫在形态上极其相似,难以区分,幼虫更无法用于鉴定。传统的形态学
鉴定、生化以及其他分子技术等方法存在费时、准确度不高、灵敏度低等缺点,
不易形成标准。我们设计筛选一对引物以及一条MGB探针,对松材线虫进行实
检测方法省时、准确、快速、无污染。
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张绍松1,H.Peterka2,H.Budah
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