高效液相色谱法测定海水中叶绿素—a的分析方法研析.pdfVIP

船舶防污染经济研讨会 中国航海学会船舶防污染专业委员会 高效液相色谱法测定海水中叶绿素一a的分析方法研究 邵秘华‘张素香2周立新‘马加蕊2徐恒振2 16026 1、大连海事大学环境科学与工程学院，大连，1 16023 2、国家海洋局海洋环境保护研究所，大连，1 摘要在环境科学学科中，研究海水中的叶绿素量，是为了掌握海洋资源 基础生产量分布的指标，本文笔者和研究人员选用目前团际上推荐的一 种新方法高效液相色谱法，做了有关该法测定条件实验的研究，木实验 并采用备有光电二极管阵列检测器的HPLC进行分析的方法 关键词高效液相色谱法海水叶绿素≥ 1、前言 海水中浮游植物含有多种色素，叶绿素是最重要色素，主要有叶绿素a、 b、c三种。通常叶绿素．a在浮游植物体中占有机物干重的确1％。2％，它是估 计初级生产力和生物量的指标，也是海水赤潮监视，监测及卫星遥感监测项目 指标之一。目前，叶绿素．a的测定有荧光光度法和分光光度法，在环境科学学 科中，研究海水中的叶绿素量，是为了掌握海洋资源基础生产量分布的指标。 荧光法具有灵敏度较高，所需样品少，在测定叶绿素一a的同时，可测出其降解 产物——脱美色素。如排除它对叶绿素-a测定干扰，还可把叶绿素．a与脱镁色 素的比值作为衡量浮游植物生理状态优劣的指标。采用荧光分析方法时做样品 处理步骤繁杂，叶绿素三种各成分分离困难，故只能作为叶绿素的总量分析； 分光光度法灵敏度较低，试样取样体积较大，过滤操作繁琐，但是可根据叶绿 素a、b、c吸收峰波长不同，测得三者的各自含量，但再现性结果精密度较 差：为了解决分光光度灵敏度等方面的不足，本文笔者和研究人员选用高效液 相色谱法， 也是目前国际上推荐的一种新方法。 为此，做了有关该法测定条件实验的研究，本实验并采用备有光电二极管 阵列检测器的HPLC进行分析的方法。现将有关参数分析结果叙述如下，其方 法测定的有较高灵敏度，检出限低，结果令其人满意。同时，也为海洋上不境的 海水遥感监测与海水环境监测方法的对比和应用，提供有利科学依据。 2、叶绿素标准溶液的分析实验 140p L，用波长处339nm、430rim监视 (1)叶绿素-a g／L标准溶夜注入50u 的色谱图。经监测确认叶绿素-a出峰时间为12．9rain，叶绿素．a标准溶 液的色谱图参见图1； (2)本实验通过对叶绿素-a光谱扫描，确定出叶绿素一a的光谱最大吸收峰波 长为430nm，叶绿素．a标准溶液光谱图参见图2： (3)HPLC型高效液相色谱仪技术参数的选定，仪器参数条件参见表1。 船舶防污染经济研讨会 中国航海学会船舶防污染专业委员会 图1 叶绿素(a)标准溶液的色谱图 - I } t ： ：