复合MTX硫酸钙人工骨体外释药特性的研究.pdfVIP

复合MTX硫酸钙人工骨体外释药特性研究 曾 明1 董扬1何怡青2崔练2曾炳妒 l：上海交通大学附属第六人民医院骨科 2：上海交通大学附属第六人民医院中心实验室 骨肉瘤的总体发病率并不高，但集中在10～40岁年龄段，占骨肉瘤总体的85．6％。以提高远 期生存率为目的的骨肉瘤临床治疗研究，始终是骨肿瘤骨病研究的重点和前沿。 在肿瘤化疗和新辅助化疗概念提出并应用于肿瘤临床治疗前，骨肉瘤的远期生存率是极低的13]。 化疗及新辅助化疗的应用对骨肉瘤的治疗和预后带来根本性的改观。尽管新辅助化疗措施的应用， 骨肉瘤的局部复发率仍然较高。肿瘤局部复发是骨肉瘤远期生存率的重要影响因素之一。肿瘤化疗 存在明显的全身毒副反应。为了提高生存率，减少局部复发，同时降低肿瘤化疗的全身性毒副反应， 在上世纪七十年代提出了肿瘤局部缓释化疗的概念。为了达到局部化疗的效果，同时解决骨肿瘤切 HU等率先提出在丙烯酸骨水泥中复合MTX填 除后造成了负重骨骼的生物力学缺陷，Langendorff 补骨缺损的治疗方案。目前应用于骨肿瘤植入化疗缓释剂的载体材料有丙烯酸骨水泥、磷酸钙骨水 泥、陶瓷型人工骨、壳聚糖等。 在内的多种化疗药、抗生素的缓释载体。本研究拟以硫酸钙人工骨为载体，分析在复合4％MTX条 件下，24小时内体外药物释放特性，并初步探讨该载体的药物释放规律。 材料与方法 1．仪器与试剂 注射用MTX粉针剂，由上海华联制药有限公司提供，批号050601B。硫酸钙人工骨 Merck公司提供，其他试剂均为分析纯。所用水为由MiIIi—Q超纯水纯化系统提供的超纯水。 实验用SPH—210B标准型大容量全温度恒温培养震荡器，由厦门迈凯伦科技有限公司提供。 药物浓度分析采用Aglient 1200液相色谱系统，由美国Aglient科技公司提供。 2．实验方法 以96孔培养板为模板，制备药粒。准确称取硫酸钙人工骨固相粉末365mg，MTX粉针剂20mg， 混匀后加入以96孔培养板为模板，后加入硫酸钙人工骨液相成分115ul。固化后割开培养板，分开 药粒，周围稍作修整，保持药粒周边塑料外壳完整，以一侧圆截面作为释放界面。 配制Tris缓冲生理盐水作为模拟体液。取5mlTris缓冲生理盐水放入三角烧瓶，使药粒浸没于 溶液中，加塞密闭，后置于恒温培养震荡器，设置温度37．5℃，转速50rpn，间隔2小时取样。为 保证前后样本无干扰，每次取样完成后，换用经清洗烘干的三角烧瓶，药粒表面以吸水纸吸干。 配制系列浓度MTX标准溶液。 C18不锈钢柱 药物浓度测量采用Aglient1200液相色谱系统，色谱条件如下：ODS 波长303nm，柱温为25℃。 首先检测标准溶液浓度，绘制吸收峰曲线，后检测样本，同时行标准及空白对照。样品药物浓 度经同期测量标准及标准曲线二次校准后确定。 6．12进行统计学分析。 所得数据由SAS 结果 1．标准药物浓度曲线 对标准药物浓度曲线分析如下。 由图1可知，线性拟合则大多数散点均未包括在内，见图中红线，而以二次曲线拟合则曲线与 _l医l：ll翻生塾!量全堡堡丝塑坌鲨 !塑三!堡!!：!!兰垄 散点吻合良好；因此，药物浓度与吸收峰曲线下面积关系为二次曲线，而非通常所认为的线性关系。 对此进行回归分析，回归方程如下： X。 Y2=992364．091 其中，X为药物浓度，Y为吸收峰曲线下面积。相关系数r=0．9985。回归方程显著性检验F= 47063．219，P=0．0001。 2．24小时药物释放浓度分析 因每次测量结果存在偏差，故首先对每次测量结果的标准对照进行校准，而后，以这一校准标 准依次校正同一次测量中每一