冠状动脉结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型.pdfVIP

第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 冠状动脉结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型 宋威江杜金行 1．北京中医药大学(北京，100029)2．卫生部中日友好医院(北京，100029) 心肌梗死(MI)是心血管病中最危重的急性事件，是21世纪医学亟待解决的难题之一。 由于MI的许多病理生理资料难以从临床研究中获得，其防治上的进展有赖于基础研究上的 突破，因此动物模型被广泛应用。MI动物模型的建立对于研究人类MI的病理生理变化、心 电生理改变以及评价各种治疗方法具有重大价值。 有关MI动物模型的制作，国内外采用结扎、药物、冷冻、栓塞、电凝等方法制作兔、 大鼠、狗等不同动物的心肌梗死模型。大多数学者认为，结扎左冠状动脉左前降支复制的 MI模型与心肌梗死实际发病过程更符合，并且其梗死部位、分布范围相对一致，病理生理、 生化改变与临床心肌梗死更相似。并且相对于其他动物，大鼠有许多便利：①大鼠的品系比 较纯正，动物组内差异较少；②经济实惠，容易饲养，术前术后管理比较容易；⑨大鼠的冠 脉系统侧支循环比较少，一旦结扎之后，容易出现一个比较固定的缺血区，这样使心肌梗死 的模型容易稳定；④大鼠心肌梗死模型的制作手术比较小，单人就能操作，对实验仪器要求 不高，便于实验的开展。故结扎大鼠左冠状动脉前降支造MI模型是一个被广泛接受近于成 熟的造模方法。 造模原理冠状动脉虽小，但血流量很大。占心排血量的5％，这就保证了心脏有足够 的营养，维持它有力地昼夜不停地跳动。如果冠状动脉突然阻塞，不能很快建立侧支循环， 常常导致心肌梗死。但若冠状动脉阻塞是缓慢形成的，则侧支可逐渐扩张，并可建立新的侧 支循环，起代偿的作用。左冠状动脉为最大冠状动脉分支，主要供应左心室前壁和侧壁，其 主要分支是左前降支和左回旋支。选用结扎鼠左冠状动脉前降支中上1／3处结扎的方法， 冠状动脉突然阻塞，侧支循环来不及起代偿的作用．以建立稳定的心肌梗死模型。 实验步骤分为如下几步： 1．动物选择多篇文献提出，制作心肌梗死动物模型的大鼠体重以200250g为宜。 动物太小，不利于操作，耐受创伤能力低；而体重及鼠龄太大，则不利术后观察生存期，而 466 第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 且麻醉剂量不好掌握，并且凝血功能较差，不易止血。 2．动物的麻醉戊巴比妥钠麻醉通过腹腔给药，一次给药能持续较长的时间，麻醉过程 比较平稳，对心肺功能影响较小，对呼吸抑制作用较小，诱导速度比较快。因此选用戊巴比 妥钠按照50mg／kg的比例进行腹腔注射。注射前回吸，以确定没有刺入血管中。麻醉成功的 标志为翻正反射、角膜反射消失，呼吸浅快。 3．气管插管将鼠置于一个三角形的斜面上，用皮筋挂住鼠的门齿，将鼠头略向后仰， 6 用台灯照射鼠的颈部，一手用镊子将鼠的舌头向外牵拉，另一手用带管芯的1 G静脉留置 针(剪去尖端)轻轻向上挑舌根，这时即可看见不断开合的声门，慢慢将管对准声门向前探去， 但不要接触到声门周围组织，待声门开放的时候，匀速将管送人声门，并拔出管芯。用一个 毛发在管口试验，以判断是否在气管中，如果不是，可将插管退出少许，不用管芯进行二次 插管，如果3次都没有插管成功，就应放弃这只鼠。因为反复操作刺激大鼠喉部，易使其喉 部粘膜水肿，气道分泌物增加，导致气道阻塞甚至窒息死亡。插管成功后，用胶布将插管固 定在鼠上颌和头部。 4．小动物呼吸机辅助呼吸调整呼吸参数，呼吸比为1：1．5，呼吸频率100次／min， 潮气量为0．4～0．6ⅢL。 5．开胸及冠状动脉结扎心前区域剃毛，在心脏搏动最明显处，第三肋间隙水平开胸， 皮肤切口约1．5．-一2．0cm，逐层钝性分离肌肉至胸膜。剪开胸膜，用眼科开睑器撑开肋间 肌切口，以无菌棉球向下压迫左肺以保护肺脏剪开心包，用无菌棉签推开左心耳。在左心耳 下距主动脉根部2～3film处入针，缝扎的中点在左心耳和肺动脉圆锥的交界和心尖连线上， m 用6-0线穿过一小束心肌，进针深度为1．5m左右，并结扎。结扎的时候要控制打结的力 度，既能在打结的过程中可见到下方大面积心肌表面变得苍白，室壁运动明显减弱，但又不