Pg—LPS对心理应激大鼠巨噬细胞功能影响的分子生物学机制的研究.pdfVIP

Pg-LPS对心理应激大鼠巨噬细胞功能影响的 分子生物学机制研究 林实 可激活牙周组织中的多种靶细胞，包括免疫反应细胞(巨噬细胞和淋巴细胞)、具有防御作用的中 性粒细胞、牙周组织的主体细胞(成纤维细胞)、成骨细胞和破骨细胞等。促使这些细胞合成、分 泌各种细胞因子及炎症介质，参与牙周组织创伤。 研究表明LPS在浓度低至lpg／m1时即可刺 激单核一巨噬细胞产生细胞因子和炎症介质。但是单纯的微生物因素尚不能导致牙周病损，近年 来研究表明，易感的宿主因素是牙周病发生的基本要素，有的学者认为甚至是决定性因素。宿主 对细菌的挑战具有明显不同的反应，此反应受全身因素的调控和环境因素的影响，一此个体对某 些细菌及内毒素可产生异常高的炎症反应，释放大量细胞因子。一些全身因素如内分泌失调、免 疫缺陷、精神压力、遗传、营养不良等都可影响宿主防御系统，降低宿主防御力和修复力。或加 重牙周组织的炎症反应和破坏。 应激是HanSalye在20世纪30年代提出的一种在外环境剧变的刺激时，机体出现的综 合应答状态，包括精神、神经、内分泌和免疫等方面的反应，是一种内外环境相合作用的结果。 现代应激理论认为，应激属于防御适应性的反应，是机体组织在漫长的进化过程中不断与环境因 素作用而获得内在的抗损伤的能力。适度的应激可启动机体内源性的保护机制，动员机体非特异 性适应系统，提高机体对内外环境干扰因素的抵抗，提高机体的免疫能力；但过度的应激，比如 应激源过于强烈持久，虽然机体的各种反应仍具有某些防御适应意义，但更为突出的反应则表现 为组织损伤和机体功能代谢障碍等对机体不利的方面。随着人们研究的深入，应激定义为：机体 的不协调状态或内环境稳定受到威胁，其主要特征为机体受到内外环境刺激后发生交感一肾上腺 髓质及垂体一肾上腺皮质 活性增强。而慢性应激一般指超过24h的持续或反复应激，该状态起因于持久的刺激，主 要伴有神经、内分泌、免疫和行为等变化。 根据前人的研究，我们发现既往文献对应激状态下牙龈卟啉菌内毒素(Porphyromonas Gingivalis 机制方面的研究都只停留在理论的推导上，为此有必要对此进行进一步的探讨，本研究就是基于 这种设想开展Pg-LPS对心理应激性大鼠巨噬细胞传导机制研究，研究包括以下四个方面： 第一部分应用基因芯片技术研究Pg-LPS对束缚应激大鼠巨噬细胞基因表达调控 (目的)应用功能性基因芯片技术研究Pg-LPS和束缚应激对大鼠巨噬细胞基因表达调控， 并分析细胞通路激活情况。(方法)应用SPF级雄性SD大鼠12只，随机分成A组(正常对照组)、 条信号通路进行检测。[结果]不同组别巨噬细胞显示在不同通路上基因激活情况：(1)应激通路： C组c-fos，Hsfl，Hsp25，Hsp90，c-jun基因上调是A组2倍以上。 作者单位：福建医大口腔医院 通讯作者：林实 59 组和A组相比GM—csf，c-fos，CD25，c-jun，c-myc，PKCalpha基因上调是A组2倍以上：C组和A 组相比c-fos，CD25，c-jun，PKCalpha基因上调是A组2倍以上：D组和A组相比 GM—csf，c-fos，CD25，c-jun，c-myc，Ornithine (6)NF-K Hoxal，Hoxbl，CRBP A组2倍以上。[结论]Pg—LPS和应激可以导致应激通路、Jak—Stat通路、钙与蛋白激酶C通路、 B通路、雄激素通路、 磷脂酶C通路上较多基因的激活；同时应激还可以引起P53通路、NF—K 维甲酸通路上较多基因的激活；当二种因素共同作用时引起多通路激活现象更加明显，尤其在和 细胞凋亡相关基因的表达上更加明显。 第二部分应用实时定量PCR技术研究Pg-LPS对束缚应激大鼠巨噬细胞部分凋亡相关基因 表达调控 [目的]应用实时定量PCR技术研究Pg—LPS对束缚应激大鼠巨噬细胞部分凋亡相关基因表达 调控． (方法)应用SPF级雄性SD大鼠12只，随机分成A组(正常对照组)、B组(应激组)、C 量检测。 [结果](1)BaxmRNA：B组和C组BaxmRNA显著高于A组(PO．01)，D组BaxmRNA不仅 显著高于A组(PO．01)，也显著高于B组和C组(PO．01)；(2)Trail