EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过NFκB促进Igκ表达.pdfVIP

EB病毒LMPl在鼻咽癌细胞中通过NF出促_硅【鲆表达 115 廖伟唐敏李建建LeoM．Lee曹亚 EB病毒(Epatein-Barr 疱疹病毒。到目前为止的研究发现。EB病毒有5个潜伏基因可能与B淋巴细胞的转化相关。 membrane protein 因功能的只有L，~妒1。 LMPl的生物学功能表现于很多方面。包括上调B细胞标志及细胞粘附分子CD23、 胞分化之间的关系也引起人们的关注…3。可以看到，LMPl的功能涉及到细胞转化、增殖、细 胞凋亡和细胞分化的各个方面。 ， 转录因子NFy．B是近年来研究的热点。在LMPl所介导的转录调控网络系统中，它处于信 与细胞增殖、分化、免疫反应、凋亡、转化有着密切关系。NRcB的激活，指的是它由胞浆转位 入胞核，启动具有v．B结合位点的基因转录表达¨J。在免疫球蛋白Kappa轻链基因(IgK基因) 的37末端增强子存在出的结合位点，与该位点结合后，NFr．B可以促进Igx的表达J。 对鼻咽癌癌变的分子机理的研究同时还揭示其癌变过程涉及到多个基因的变化，其中Tx kb片段进行核 是与鼻咽癌发病有关的亚性转化基因L6J。对Tk基因中一个与转化有关的2．8 苷酸序列分析，并与已知基因进行同源性比较，发现Tk基因与人免疫球蛋白x appa基因(I弘) 图谱及Southern印迹杂交分析，也进一步支持这一观点L“。 由此，我们设想利用新近发展的四环素诱导表达系统，建立受四环素调控表达LMPl的 鼻咽癌细胞系，以探讨在鼻咽癌中。LMPl是否通过NFr．B促进Igr基因的表达。 展的基础研究”项目资助 Synthesis Laboratory，NCI，Frederick，M．D．usA(kM．Lee) 116 中国癌症研究进展⑤ jiI聃与麦法 1．细胞系 鼻咽癌细胞系HNE2是湖南医科大学肿瘤研究所建立的EB病毒阴性的低分 化鳞癌细胞株【8J。PCR进一步证实其中LMP一1为阴性。经两轮稳定的转染，将四环素基因 LMPl mg／L G418和50 · mg／L潮霉素筛选药物浓度。 pcDNALMPl反义表达质粒均由CMV启动子启动表达，插入片段为3．0kb的LMPl基因。 HNE2。具 两种质粒以一过性转染法用LiIx)fecTAMINE(GibcoBRL公司)导人pTet—on-LMPl 体操作按厂家提供的方法进行。 。 3．硫代磷酸化寡脱氧核苷酸有叉和反义NFJcl3p65及西0的设计硫代磷酸化修饰的寡 脱氧核苷酸是进行反义核酸干预的有效方法。根据文献，设计针对口65及pS0的37末端硫代 磷酸化修饰的有义和反义寡脱氧核苷酸，NFd3p65有义寡脱氧核苷酸：5 7；NFr．B 7．