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为大样本大面积筛检HBV基因突变的主要方法。基因芯片 苷酸探针杂交后,经过激光扫描仪搜集信息,软件分析,用计
DNA
又称微型DNA阵列,它是近年来发展起来的高效分子诊断 算机处理诊断。本文用基因芯片法检测了81例瑚Bv
技术,目前广泛用于基因表达谱分析,但应用基因芯片检测
HBVⅨqA前C区及BCP区变异得报道还不多。它是将针对1764位、1762位4个位点的基因变异情况,发现该法检测快
病原体的特征性基因片段或基因序列设计的探针以矩阵排列 速,敏感性高,特异性较好,重复率高,不仅能同时检测出4个
在经过处理的玻片上而制成。已经设计了乙型、丙型肝炎基 位点的变异。而且能检浏出野生株和变异株共存,即混合感
因诊断芯片检测血清及肝组织中HBVDNA特征序列,设计
寡核苷酸探针,密集点样固定在特殊处理的载波片上,制成乙 荧光定量结果正相关,能较好的反应出患者血清中的病毒含
型肝炎基因诊断芯片。通过PER扩增乙型肝炎患者血清中 量,实验结果对于临床的诊断、治疗及预后监测具有很好了指
的DNA特殊片段,掺入标记荧光分子。与芯片的微阵列寡核 导作用。但在特异性方面尚需进一步改善和提高。
TⅣ研究现状与进展
潘发愤
随着分子生物学技术的发展。甲~庚型肝炎病毒相继被 酸序列十分保守,其中富含鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C),形成具
发现,但在临床病毒性肝炎患者中有相当一部份(5%-10%)茎环(aem-bop)特征性二级结构。在病毒复制中可能有重要
病例无法用已建立的甲~庚型肝炎的实验室方法进行病原学 调控作用。同样,利用该区域建立敏感特异的PCR方法可检
分析,所以被统称为非甲~非庚型肝炎,或被称之为病毒性肝 测不同型别的11Ⅳ变异株。另外,ORFl的中部还存在3个
炎—病因未明。1997年12月日本学者Nishizawa等应用代高变区(hypervariableregion,HVR),此处的核苷酸序列高度
变异。这可能与病毒逃避机体的免疫监视。在体内长期存在持
表性差异分析RDA)技术。从·名输血后肝炎患者血清中克
隆出了—个500Bp长的DNA片段,经检索发现其与GenBank
中收录的人、动物、真菌、细菌等基因组均缺乏同源性,而类似 目前尚不清楚,有待于进一步深人研究。
二、流行病学
于病毒的基因结构。因此,命名为洲T均n幽I豳玎tranmlit-
ted 流行病学研究已证明们Ⅳ不但可通过血液、肠道传播,
virus们Ⅳ)。一项近期研究发现:通过原位杂交技术证明
们Ⅳ位于肝细胞内,肝脏中原位PER法检测的们Ⅳ滴度高 而且还可通过非肠道途径传播。根据北京、深圳等地的研究
于血清中的滴度。有报道TⅣ感染与爆发性肝炎和慢性肝 显示,一般人群们Ⅳ的阳性率为7.8%(7/90)。且与地区、年
病有关,但是这些联系仍未被证实。对1]Ⅳ的持续性研究 龄、性别、人种、和生活环境有关;正常献血员为5.0%~14.
表明在种群中存在着相当大的差异。这一家族的成员目前有
在非甲~非庚型肝炎患者中们Ⅳ阳性率为46.8%(33/79);
TT病毒(Trv),丁rv相关病毒SANBc5IN和YONBAN。
mini
们Ⅳ样微小病毒(1]Ⅳ一likevLmsⅡ^小,)和SEN病毒
友病患者为46.0%(26/57).非甲~非戊型肝炎患者46%
(SEN-V),引起了医学界的广泛关注,现就TⅣ的研究现
状与进展阐述如下: (41/90)。也有研究报道从们Ⅳ感染者的咽部检出高浓度
一、1]Ⅳ的病毒学特点 TTVDNA,故可认为11Ⅳ可经口或飞沫传播。另外,通过对
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