鸡肠内菌发酵黄芪转化多糖的实验的研究.pdfVIP

3 《中兽医学杂志》2009年增刊 参考文献 32(9)： [1]叶宇齐，姚红梅，邢玉霞l生化汤加味促进产后子宫缩复465例辽宁中医杂志，2005 93l [2]袁忠志；李继云．中药益母草预防和抑制微小血管血栓形成的作用[J]．深圳中西医结 合杂志，2003，13(3)：148一150。 [33宋金春，曾俊芬，王玉广，等．生化汤对大鼠血液流变性的影响．中国药学杂志，2005，40(24)： 1856--1858． [5]李麟仙．活血化瘀药物中动物楔．“I的概况[J]．中西医结合杂志，1985，5(4)：255． [6]鲍军．家兔急性血瘀证模型的研究[J]．中西医结合杂志，1986，6(6)：357． [7]陈可冀．血瘀证与活血化瘀研究[M]．上海：上海科学技术出版社，1990 [8]翁维良，廖福龙．吴云鹏．血液流变学研究方法及其应用[M]．科学出版社，11989． [9]廖福龙．临床血液流变学EM]．天津：天津科技翻译出版社．1987． 鸡肠内菌发酵黄芪转化多糖的实验研究 张凯’，杨志强’，李建喜¨，王学智’，孟嘉仁。，朱新术2 (1．中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，甘肃兰州730050； 2．中国科学院青岛能源所，山东青岛) 【摘要】目的筛选与驯化能发酵黄芪的优良乳酸菌并研究与其相互作用，为开发新型饲料添加剂做准备。方 法选取能厌3j发酵黄芪药液的优良乳酸菌，通过在添加黄芪药液的发酵培养基中反复传代对其进行驯化，并用蒽酮 一硫酸法测定发酵前后租i多糖的含量，用比浊法测定菌体浓艘，并用单因素法研究了最佳黄芪添加量和最佳接种量， 初步研究驯化菌株与黄芪药液的相互作用。结果经过6次传代驯化后，驯化菌株发酵黄芪药液后可使其糖l多糖得率 提高111．996，而黄芪药液能促进驯化菌株的增殖，可使菌体浓度提高251％。结论驯化菌株与黄芪药液发生了良性的 相互作用，有可能开发}lj新型饲料添加剂。 【关键词】黄芪：乳酸菌：驯化；相互作用 随着微生态学的发展，微生态学理论、方法开始被引入中草药药学的研究…，人们逐渐认识到 生物体内的正常菌群对口服中草约药理作用的发挥有着重要作用，表现为可使中药活性成分较人限 度的释放出来、对中药活性成分进行修饰产生新的活性物质等心1。目前已经有大量乳酸菌和中草药 用于畜牧业中的报道，但利心动物肠道乳酸菌发酵中草药，用中草药驯化乳酸菌的报道则不多见。 基于微生物经过反复诱导和驯化可以产生新酶系，乳酸菌发酵过程中会产生大量有机酸使培养液酸 度大为提高，而酸碱法是中草药多糖的提取方法之一这一事实，可以设想通过用中草药驯化乳酸菌 有利于中草药多糖的提取和产生新的活性成分。 1材料与方法 1．1材料 试验菌株，CM菌，由本实验室分离和保藏；黄芪经鉴定为英膜黄芪，购自兰州黄河药市：培 养基为GAM培养基，基本组成为胰酪蛋白肽1％、大豆胨0．3％、酵母浸粉0．5％、牛肉膏0．2％、消化血 资助项目：中央级公益性科研院所基本科研业务赞专项资金项目(BRF060302)：甘肃省生物技术专项 作者简介：张凯，男，1982．，硕J上，主要从事中兽医药现代化研究，c．mail：fyjohn@sina．com； 4 《中兽医学杂志》2009年增刊 自青岛海搏生物技术有限公司；蒽酮、硫酸为常规分析纯级试剂。 1．2方法 1．2．1黄芪药液制备与粗多糖含量的测定黄芪水提浓缩成1．0 g／mL的药液。以恒重葡萄糖为对照品， 用文献【3】中介绍的葸酮．硫酸法制备测定粗多糖含量的标准曲线。黄芪药液和发酵液离心后，取上清 液，醇沉后用葸酮．硫酸法和制备的标准曲线测定并计算粗多糖得率。 1．2．2菌体浓度测定取一定量的发酵液与无药对照加4倍蒸馏水稀释后，用可见光分光光度计于 600nm处测定菌体浓度。 1．2．3乳酸菌的驯化把CM菌接种于含6％黄芪药液的GAM培养基中，以发酵液中粗多糖得率为指标，反 复传代，得率明显上升认为已驯化好，并把菌株接入无药培养基中，观察生长情况。