不同剂量痛泻要方对IBS大鼠内脏高敏感性和肥大细胞的影响.pdfVIP

结果治疗组总有效率为91．1％，对照组为75．0％，两组比较差异有统计学意义(尸O．0S)。 结论 自拟柴郁诃子汤对腹泻型肠易激综合征有较好疗效。 不同剂量痛泻要方对IBS大鼠内脏高敏感性 及肥大细胞的影响 钦丹萍康年松 浙江省中医院 肠易激综合征(mS)是临床上常见的一种功能性胃肠病。以腹部不适或腹痛伴排便异常为主 要特征。近年来的研究显示内脏高敏感性是IBS特征性的病理生理基础，而肥大细胞(MC)在其 中的作用受到越来越多的研究者的重视。研究表明IBS患者胃肠道的不同节段均存在着内脏感觉异 常，同时研究证实IvIC与IBS内脏敏感性关系密切。 根据对IBS症状学的调查分析，我国以腹泻型IBS多见，按照其I临床表现与特征，可归属于中医“腹 痛’、“泄泻’之范畴。痛泻要方多用于肝郁脾虚型，现代临床多用于腹泻型IBS。其临床已被证实具有 良好疗效。本课题以IBS内脏高敏感性大鼠为对象，给予目前临床常用的痛泻要方治疗，观察其对IBS 大鼠的内脏敏感性、MC活化的影响，了解不同剂量痛泻要方对IBS的内脏高敏感性的干预作用。 一、实验材料与方法 1．材料 1．1动物 清洁级成年雄性SD大鼠60只，体重200-士209，由浙江中医药大学实验动物中心提供。 1．2药物、试剂及仪器 痛泻要方各药材由浙江省中医院中药房提供，该方由炒自术189、炒自芍129、陈皮129、防 保存备用。 Lab公司提供。C-Fos P物质由杭州中肽生化有限公司提供。大鼠组胺Elisa试剂盒由RapidBio 宝特公司。 2．方法 2．1动物分组和模型的建立 SD大鼠随机分为空白组对照组、模型对照组以及痛泻要方低剂量组、中剂量组和高剂量组。 采用改良应激束缚法建立动物模型。应激前30rain，各组大鼠均予药物或等量生理盐水灌胃，剂量 按ImFl009体重计算。正常组及模型组均给予生理盐水。痛泻要方高、中、低剂量组分别相应浓 度的痛泻要方煎剂。 2．2标本采集 行颈椎脱臼处死大鼠，取近端结肠(距回结肠连接处2crn)粘膜环周一圈，宽度为lcm。 2．3观察指标 2．3．1 内脏敏感性评价 在束缚应激程序结束后，给予大鼠不同容量的直肠气囊注水扩张，容量由低到高递增(0、0．5、 ·386· withdrawal reflex，AWR)情况，给予AWR半定量评分． 2．3．2肥大细胞观察 (一)肥大细胞数量观察：采用改良甲苯胺蓝染色法，普通光镜下每张切片随机选择3个视野， 在高倍镜(x400)下对结肠组织MC(包括完整的和脱颗粒的MC)进行计数，取其平均值，结果 以个数，高倍视野表示。 (二)组胺释放试验：在室温下(20C)，将结肠黏膜组织在含有P物质的林格缓冲液中孵育 l h，反应结束后吸取上层液体O．5 mI，通过酶免疫法测定组胺含量，结果以nmoVg组织表示。 (三)组织C．Fos阳性率：结肠组织按链霉菌抗生物素蛋白．过氧化酶法C-Fos的免疫组织化 学染色，再对同一切片进行改良甲苯胺蓝染色，观察C-Fos免疫组织化学染色阳性率。在200倍视 野下记录每个区域一个视野内的阳性细胞数，取其平均值。 2．4统计学处理修改 选用SPSS11．0统计软件处理，收集到的数据均以i士s表示，正态资料采用Tarnhane检验， 偏态资料采用秩和检验，以P0．05为差异有显著性意义。 二、结果 1．腹部回缩反射 在不同容量扩张下，痛泻要方各剂量组的AWR评分较模型对照组明显下降(户0．05，P0．01)， 0．408)。见表l。 表1 痛泻要方对大鼠在不同直肠气囊扩张容量下AWR评分的影响(i士s，n-=150) AA P0．01 与空白对照组比较：’P0．05”P0．01