FISH技术对亚硝酸盐氧化菌定量解析.pdfVIP

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2017-08-13 发布于安徽
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FISH技术对亚硝酸盐氧化菌定量解析.pdf

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首届全国微生物污染防治监测新技术与环境安伞管理研讨交流会 FISH技术对亚硝酸盐氧化菌的定量解析碾星林炜铁华南理工大学生物科学与工程学院，广州510006139．tom inSitu 摘要：荧光原位杂交(Fluorescence 及微生物研究的有效手段，可以定性及定量的对绝人多数微生物进行实时观测研究。利 rRNA序列的荧光探针，优化 bacteria，NOB)16S 用基于亚硝酸盐氧化菌(nitrite．oxidizing 针对亚硝酸盐氧化菌的FISH技术实验条件．确定了FISH技术定量检测亚硝酸盐氧化菌的具体方法，并优化了样品与处理的实验条件为热固定2h，4％多聚甲醛圃定15min，乙醇脱水5min；杂交过程的实验条件为杂交温度46℃，杂交时间3h，洗脱液中NaCl 浓度60mmol·L一。关键词：荧光原位杂交；亚硝酸盐氧化菌；优化 offluorescenceinsitu to Quantitative analysis hybridization detect bacteria nitrite—oxidizing ZHANGL1NWe#Tie Xing ofBioscienceand China of (School University Bioengineering，SouthTechnology， Guangzhou 510006139．com) inSitu asaneffectiveto Abstract：FISH(Fluorescence way Hybridization)technology and of of for determinethesort theamountbacteriaand conditionsFISH cells．Experimental bacteria(NOB)are the detectingnitrite·oxidizing optimizedthroughorthogonaltest，byusing basedon 6 commonfluorescent bacteria1 SrRNA probe nitrite-oxidizing sequence．Results for showthatthe conditions are timeof2h，ethanol optimal samplepreparationheat—fixing