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虫草菌丝提取物对二甲基亚硝胺大鼠肝硬化门静脉高压的预防与治疗作用.pdfVIP

虫草菌丝提取物对二甲基亚硝胺大鼠肝硬化门静脉高压的预防与治疗作用.pdf

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虫草菌丝提取物对二甲基亚硝胺大鼠 肝硬化门静脉高压的预防和治疗作用 王宪波1刘平2唐志鹏3 1北京地坛医院(100015)2上海中医药大学肝病研究所 3上海中医药大学附属龙华医院 门静脉高压是肝硬化的常见并发症,也是影响肝硬化患者预后的重要因素,积极寻找治疗肝硬 DMN)诱导大鼠肝纤维化动物模型类似人类肝纤维化和肝硬化病理特征,常用于研究肝纤维化和肝 硬化门静脉高压的发病机制和药物干预研究。虫草菌丝及其各种制剂常用于治疗各种肝病,但尚未 见到有关其治疗肝硬化门静脉高压的研究报道,本研究旨在探讨虫草菌丝提取物对DMN大鼠门静 脉高压的预防和治疗作用,以期为临床治疗提供新的手段和方法。 一、材料和方法 1材料 紫株式会社产品,lot.MAL05。虫草菌丝(Cordyceps 会社,MIR8282。Power 晰度彩色病理图文分析系统,购自武汉同济医大干屏影像工程公司。 2实验方法 2.1模型制备和分组 连续3d,每天1次,共4周。模型大鼠分别于造模后2周、4周、6周、8周作动态观察,每时间点 随机取5只模型大鼠和3只正常对照大鼠。 倍量)灌胃,每日1次;分别于给药后2周及4周各取5只动物作动态观察。大鼠经4周造模成型 后,有10只模型大鼠给虫草菌丝提取物治疗,用药剂量与方法同预防给药,分别于给药后2周及4 周作动态观察。正常对照大鼠12只,前4周给予生理盐水腹腔注射和生理盐水灌胃,剂量和方法同 模型组;第5周至第8周单纯给予生理盐水灌胃。 2.2观察指标 2.2.1门静脉直径及压力的测定 大鼠用2%戊巴比妥钠以2m1.蚝d体重剂量腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,打开腹腔,暴露门脉 主干,采用游标卡测量距肝门0.5cm处的门静脉直径;于肠系膜前静脉右侧靠近门脉处分离出一回 肠肠系膜静脉分支,结扎其远端,然后用血管剪剪开一适宜缺El,将PE.100导管自缺口插入后,沿 Lab生理数据 肠系膜前静脉上行,通过脾静脉至门脉主干,固定导管并接通压力换能器,经Power 处理和分析系统获得门静脉压力(Ppv,mmI-Ig)数据。 2.2.2血清生化学检测 血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine (Aspartate 一670一 采用卫生部上海生物制品研究所试剂盒测定。 2.2.3肝组织羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量测定:Jamall氏法。 2.2.4肝脏组织学观察:肝组织HE染色、胶原纤维染色(天狼星红染色)。 图像定量分析:胶原纤维染色切片每组各取3张,随机选择5个不同视野,在20×10放大倍数 下,测定标准测量窗口中肝组织阳性区域的面积比。 2.3统计学处理 进行两两比较;用Regression程序进行相关性检验。有关数据以均数标准差(i签)表示,显著性 差异以p0.05表示。 二、结果 (一)虫草菌丝提取物对DMN大鼠门静脉高压的预防作用 1门脉直径与压力变化 与同期模型组比较,预防组2周时门脉直径无显著变化(p0.05),预防用药4周时则门脉直径 脉压力较同期模型组显著降低(p0.05)。见表l。 表1 虫草菌丝提取物预防DMN肝纤维化形成过程大鼠门脉直径和压力的变化(i蚂) 注:与同期DMN模型组比较,木p0.05 2血清朋,一T、AST活性和TB几、Alb、HA含量变化 无明显变化(p0.05),预防用药4周,HA含量显著下降(po.05)。见表2。 表2虫草菌丝提取物预防DMN肝纤维化形成过程大鼠血清和肝组织各项指标的变化(i酆) 注:与同期DMN模型组比较,掌p0.05 3肝组织Hyp含量变化 预防用药2周时,肝组织Hyp含量与同期模型组比较无明显变化(p0.05),而预防用药至4周 时,Hyp含量显著低于同期模型组(pO.05)。见表2。 5肝组织病理学变化 与同期模型组比较,预防组组织内出血和肝细胞变性坏死明显减轻,肝窦壁细胞增生和肝窦扭 ..—.671.--—— 曲、闭塞程度减轻,门脉区胶原

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