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虫草菌丝提取物对二甲基亚硝胺大鼠
肝硬化门静脉高压的预防和治疗作用
王宪波1刘平2唐志鹏3
1北京地坛医院(100015)2上海中医药大学肝病研究所
3上海中医药大学附属龙华医院
门静脉高压是肝硬化的常见并发症,也是影响肝硬化患者预后的重要因素,积极寻找治疗肝硬
DMN)诱导大鼠肝纤维化动物模型类似人类肝纤维化和肝硬化病理特征,常用于研究肝纤维化和肝
硬化门静脉高压的发病机制和药物干预研究。虫草菌丝及其各种制剂常用于治疗各种肝病,但尚未
见到有关其治疗肝硬化门静脉高压的研究报道,本研究旨在探讨虫草菌丝提取物对DMN大鼠门静
脉高压的预防和治疗作用,以期为临床治疗提供新的手段和方法。
一、材料和方法
1材料
紫株式会社产品,lot.MAL05。虫草菌丝(Cordyceps
会社,MIR8282。Power
晰度彩色病理图文分析系统,购自武汉同济医大干屏影像工程公司。
2实验方法
2.1模型制备和分组
连续3d,每天1次,共4周。模型大鼠分别于造模后2周、4周、6周、8周作动态观察,每时间点
随机取5只模型大鼠和3只正常对照大鼠。
倍量)灌胃,每日1次;分别于给药后2周及4周各取5只动物作动态观察。大鼠经4周造模成型
后,有10只模型大鼠给虫草菌丝提取物治疗,用药剂量与方法同预防给药,分别于给药后2周及4
周作动态观察。正常对照大鼠12只,前4周给予生理盐水腹腔注射和生理盐水灌胃,剂量和方法同
模型组;第5周至第8周单纯给予生理盐水灌胃。
2.2观察指标
2.2.1门静脉直径及压力的测定
大鼠用2%戊巴比妥钠以2m1.蚝d体重剂量腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,打开腹腔,暴露门脉
主干,采用游标卡测量距肝门0.5cm处的门静脉直径;于肠系膜前静脉右侧靠近门脉处分离出一回
肠肠系膜静脉分支,结扎其远端,然后用血管剪剪开一适宜缺El,将PE.100导管自缺口插入后,沿
Lab生理数据
肠系膜前静脉上行,通过脾静脉至门脉主干,固定导管并接通压力换能器,经Power
处理和分析系统获得门静脉压力(Ppv,mmI-Ig)数据。
2.2.2血清生化学检测
血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine
(Aspartate
一670一
采用卫生部上海生物制品研究所试剂盒测定。
2.2.3肝组织羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量测定:Jamall氏法。
2.2.4肝脏组织学观察:肝组织HE染色、胶原纤维染色(天狼星红染色)。
图像定量分析:胶原纤维染色切片每组各取3张,随机选择5个不同视野,在20×10放大倍数
下,测定标准测量窗口中肝组织阳性区域的面积比。
2.3统计学处理
进行两两比较;用Regression程序进行相关性检验。有关数据以均数标准差(i签)表示,显著性
差异以p0.05表示。
二、结果
(一)虫草菌丝提取物对DMN大鼠门静脉高压的预防作用
1门脉直径与压力变化
与同期模型组比较,预防组2周时门脉直径无显著变化(p0.05),预防用药4周时则门脉直径
脉压力较同期模型组显著降低(p0.05)。见表l。
表1 虫草菌丝提取物预防DMN肝纤维化形成过程大鼠门脉直径和压力的变化(i蚂)
注:与同期DMN模型组比较,木p0.05
2血清朋,一T、AST活性和TB几、Alb、HA含量变化
无明显变化(p0.05),预防用药4周,HA含量显著下降(po.05)。见表2。
表2虫草菌丝提取物预防DMN肝纤维化形成过程大鼠血清和肝组织各项指标的变化(i酆)
注:与同期DMN模型组比较,掌p0.05
3肝组织Hyp含量变化
预防用药2周时,肝组织Hyp含量与同期模型组比较无明显变化(p0.05),而预防用药至4周
时,Hyp含量显著低于同期模型组(pO.05)。见表2。
5肝组织病理学变化
与同期模型组比较,预防组组织内出血和肝细胞变性坏死明显减轻,肝窦壁细胞增生和肝窦扭
..—.671.--——
曲、闭塞程度减轻,门脉区胶原
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