补阳还五汤有效部位对脑缺血再灌注大鼠IL-1β与ICAM-1表达的作用.pdfVIP

第六次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 ·111· 列紊乱等病理改变，引起类似人类的As的纤维斑块。 免疫损伤结合高脂饲料饮食的AS模型的机制，一般认为注射异体血清蛋白诱发了动物血清反应 导致动脉内膜损伤，表现为内膜水肿、厚度增加，促进了泡沫细胞灶的形成和脂质沉积，并促使脂 质向动脉壁转运，因此促进AS的发生和发展。同时免疫复合物还可引起机体的炎症反应及继发效应， 引起血管内膜损伤，增加血管的通透性；激发机体的补体系统，产生一系列生物活性物质，加重炎 性细胞的浸润，诱导血小板聚集和释放5羟色胺、儿茶酚胺等物质，从而进一步加重内皮损伤和血 管通透性，揭示了血瘀证的渐变过程。 本实验表明，气的升降运动失常导致气血逆乱，血脉瘀阻是引起AS的主要病机环节，又可进 一步加重气机的失调，引起物质代谢紊乱。结合血瘀证动物的特点，我们认为，免疫损伤结合高脂 模型从血液成分的变化、理化指标的升高、血液流变性的异常阐释中医“血瘀”特征，从而影响血 液、机体功能的障碍，类似于机体因情志刺激(气滞)，交感神经兴奋而出现的一系列病理性改变。 所以这种兼有“气滞”、“血瘀”因素的综合模型较单因素所致模型更切合AS复杂的病理改变。 035 补阳还五汤有效部位对脑缺血再灌注大鼠 I L-1 13和ICAM-1表达的作用木 唐映红1，陈瑞芬2，李花1，陈北阳1，邓常清1 1、湖南中医学院(长沙，410007)2、国防科技大学职工医院(长沙，410009) 脑缺血后的炎症反应在缺血性脑损伤的发生中具有霞要的作用，它可引起血流改变、水肿等， 最终导致神经元死亡。炎症反应时白细胞浸润于缺血脑组织，是导致继发性脑损伤的重要原因，采 用减少白细胞总数的药物能减轻脑缺血损伤，因而，抗缺血后炎症反应为其治疗的重要环节。外周 血中性粒细胞向缺血区迁移的主要原因是缺血区炎性细胞因子对白细胞的趋化作用及血管内皮细胞 和白细胞表面的粘附分子表达上调所致。白细胞介素．113(interleukin-1B，IL一113)是缺血性脑损 adhesion 伤炎症机制中的关键细胞因子，细胞间粘附分子．1(intercellular 缺血再灌注损伤中起重要作用，抑制IL．1B表达，阻断内皮细胞上ICAM．1与白细胞结合的位点， 可使脑缺血后梗死范围缩小，炎症反应减轻。研究表明，补阳还五汤及其有效部位可对抗脑缺血再 灌注损伤，抑制脑缺血再灌注多形核细胞向缺血脑组织的浸润，提示该方抗缺血性脑损伤的作用可 能与其抑制脑缺血后炎症反应有关。为进一步明确该方有效部位抗脑缺血后炎症反应的机制，本文 从脑组织IL．1B和ICAM．1表达研究了该方有效部位的作用。 1．材料与方法 1．1材料 1．1．1实验动物清洁级SD大鼠，雌雄兼用，体重250-～3209，中南大学湘雅医学院动物学部 提供，合格证号：医动字第20．010号。 99组成。上述药物由本院药剂科购入并鉴定，按其组成比例制备原方提取液，由原方提取液采用酸 碱沉淀、离子交换树脂层析等方法提取生物碱、苷、苷元、多糖四类有效部位，各有效部位分离完 全，相互之间无混杂，纯度70％以上。以高效液相色谱法和化学分析方法测定各有效部位中质控物 的含量，对各有效部位进行质量控制，其中生物碱中川芎嗪含量为9．76mg／g苷：苷中黄芪甲苷含量 用时以生理盐水配成质量浓度为0．1mg／mL。 ·112· 第六次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 1．1．3主要试剂和仪器多聚赖氨酸、4％多聚甲醛磷酸盐缓冲液、OCT包埋剂购自武汉博士德 生物有限公司，蔗糖购自上海生工公司；兔抗大鼠IL．1B、ICAM．1抗体购自SantaCrutz公司；兔 SP免疫组化试剂盒和DAB显色剂购自北京中山生物制剂公司。直径0．26mm单尼龙线为市售，使 用前剪成5cm长线段，筛选出前端光滑、钝园、大小均匀者，于2em处标记，前端3cm浸入多聚赖 型恒冷切片机(德国Leica公司)；MaticB5双目生物显微镜(带网格测微尺)(日本)、WV-CP230 图像采集器和Lifviews-tudio显微摄影软件(日本)。 1．2方法 1．2．1分组及实验方法：大鼠按性别、体重随机