调肝颗粒剂对非酒精性脂肪性肝病大鼠的实验探究.pdfVIP

强肝消脂饮治疗可显著降低NAFLD患者血清瘦素水平并改善NAFLD患者胰岛素抵抗状态 (P0．05)，其改善作用明显优于对照组。强肝消脂饮中党参、茯苓、山药为君药，健脾补肝益肾； 辅以干姜温中健脾化湿；白术、苍术、陈皮、厚朴化湿祛痰行滞为臣；赤芍、丹参活血养血化瘀； 首乌补肝肾；山楂、泽泻消食化滞、痰浊得以出路；益智仁温肾化浊：白芍、炙甘草养肝柔肝、防 温阳化湿太过耗伤精血；该方尚纳理中汤及平胃散方义，在补肾益精基础上健脾胃而兼顾后天之 本，同时佐以活血养血柔肝，使痰浊之化而不耗气、瘀滞之行而不伤阴；诸药合用，共奏健脾补 肝益肾、祛痰化瘀行滞之功。同时现代药理研究亦证实：丹参能通过保护SOD活性和抑制XO．IDL 的形成及减轻氧化脂蛋白中的SOD和XO．IDL对细胞的损伤。赤芍具有改善血液循环、抗氧化、 抗自由基作用；山楂、泽泻、党参、茯苓、山药、干姜、白术等均有不同程度的改善瘦素及胰岛素 抵抗的作用。 D有效，但作用的长期性及主要影响因素有待于进一 综上所述，我们认为强肝消脂饮治疗NAR 步扩大样本并结合动物模型进行研究。 (参考文献略) 调肝颗粒剂对非酒精性脂肪性肝病大鼠的实验研究 潘洋王冰黑龙江省中医研究院消化科哈尔滨(150036) 非酒精性脂肪性肝病(NAFID)是一种无过量饮酒史，与遗传、环境、代谢应激相关，并以大 量肝细胞大泡性脂肪变性为病理特征的临床综合征。其发病机制尚不完全明确，国内外亦无十分理 想的治疗药物，因此，研究非酒精性脂肪性肝病的发病机制，寻找安全有效的治疗药物成为一项重 要课题。近年来，非酒精性脂肪肝的发病率明显上升且已经成为国内外研究的热点之一。本实验以 非酒精性脂肪性肝病模型大鼠为研究对象，通过动物实验以探讨调肝颗粒剂对NAFLD的治疗作用 及其机制。 实验材料与方法 提供。实验在黑龙江省中医研究院实验动物中心进行，动物饲养室符合一级标准。 2药物及试剂 调肝颗粒剂：由柴胡、茯苓、泽泻、生山楂、决明子、厚朴、丹参等十余味中药组成，由黑龙 江省中医研究院中药制剂室提供。阳性对照药品：三七脂肝丸(由云南省玉溪望予隆生物制药有限 公司生产)、甘乐(由丹东医创药业有限责任公司生产) 为北京博奥森生物科技有限公司提供，二抗为pv6001，由北京中山生物科技有限公司提供。 3实验仪器 全自动生化分析仪OLYMPUS 莱卡2135型切片机；美国moticam3000显微摄影成像系统。 4实验方法 4．1动物模型与分组 ．．．．—615．．．—． 先将80只Wistar大鼠在实验室适应性喂养一周，从80只大鼠中随机选取71只大鼠进行造模， 喂高脂饲料lO周后，随机抽取8只大鼠处死，分别取出肝组织，10％甲醛溶液固定，石蜡包埋，切 片，苏木精．伊红染色，做病理组织学检查，以《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》中的病理诊断标准 作为确定造模是否成功的依据。将造模成功后的63只大鼠随机分成7组，每组9只，分别为模型对 为正常对照组(ZC组)。正常对照组始终喂普通饲料，模型对照组继续喂高脂饲料，其它各组改喂 普通饲料。正常对照组、模型对照组以及饮食控制组每天以生理盐水4ml灌胃；大鼠的给药剂量参 照人的给药按照体表面积折算：调肝颗粒剂高、中、低剂量组给予调肝颗粒剂生药329，(kg．d)、169， (kg-d)，把以上各组相应的药物剂量分别溶于4ml蒸馏水中灌胃，每日下午一次，连续4周。 4．2血清标本采集 于末次给药后当晚禁食不禁水，第二天早上行摘眼球采血法以获取大鼠空腹血清，然后将其放 入离心机中，3000r／rain离心15rain后取血清存放于冰箱中备用。 4．3检测血清ALT、AST、TC、TG 按试剂盒要求，于全自动生化分析仪OLYMPUS 由黑龙江省中医研究院检验中心协助完成。 4．4组织病理学检查 肝组织经10％甲醛溶液固定，石蜡切片，进行HE染色，观察大鼠肝脏病理学改变，包括肝细 胞脂肪变性、坏死、炎细胞浸润等。 4．5采用免疫组化PV二步法检测大鼠肝组织TNF-o．、CYP2El蛋白表达 次。③微波修复；切片入枸橡酸盐缓冲液(PH6)，微波炉中5分钟2次，中间间隔10分钟。自然 冷却至室温。④滴加一抗，4度冰箱中过夜，PBS冲洗2分钟3次。⑤滴加二抗，3