调肝治法方药抗慢性心理应激海马神经元凋亡的机理探究.pdfVIP

4今后研究的思路与方法 4．1 以心理应激作为研究的切入点，要考虑不同的应激反应会有不同的神经内分泌的 改变。如一些神经递质、激素在中枢与外周的变化不同；行为学及情绪变化的不同；免疫功 能变化的程度不同；中药治疗效应的不同等。因此，今后应进一步加强对应激反应模型本身 的有关生理、病理改变的研究；同时，还应动态观察整个应激反应过程中不同时间段会有哪 些不同的病理变化，在明确所采用的应激模型的基本病理生理变化的基础上进行中医药的研 究，结果会更加客观科学。 4．2在其它脏腑功能研究方面，一些研究虽然没有明确是从心理应激的角度进行研究， 但实际上所采用的方法仍然是心理应激的方法，如采用猫吓鼠方法模拟“恐伤肾以研究肾 的功能、采用睡眠剥夺方法模拟材心气虚一以研究心的功能等等n幻。采用不同的治法方药(如 补肾、养心类方药等)进行调节干预，亦有一定的效果。因此还应当与诸如养心安神类、健 脾类以及补肾类方药等作进一步的对比性研究，探讨不同方药的抗心理应激损伤的作用机 理，从而为反证不同脏腑机能提供科学依据。 4．3应当采用循证医学的理论和临床流行病学的研究方法，对处于心理应激状态的人 群或具有情感性障碍或神经症的患者进行属于中医肝病证候的调查，寻找中医肝病证候在此 类病症中的分布规律，并借助于中医体质理论，在细胞、分子等不同层次上揭示证候形成的 物质基础，从而为进一步揭示肝主疏泄，调畅情志功能的神经生物学机制提供科学的依据。 调肝治法方药抗慢性心理应激海马神经元凋亡的机理研究 王文竹严灿徐志伟吴丽丽史亚飞 广州中医药大学(广州 510405) 心理应激是指由于个体在生活适应过程中的关于环境要求与自身应付能力不平衡的认 识所引起的一种身心紧张状态，主要可以通过感知、情感、行为和生理机制影响健康，机体 的应激机制与许多疾病的发生、发展和转归有着密切的关系。应激最主要的特征是下丘脑一 垂体一肾上腺皮质(HPA)轴激活，导致糖皮质激素(GC)分泌增加。海马结构富含各种信使 受体，尤其是高密度的皮质类固醇激素受体(corticosteroid 远高于其它脑区n1，它们对维持海马神经细胞的兴奋性、神经生化功能的正常和结构的可塑 性具有重要作用n1。在应激反应中，它不仅是HPA轴高位调节中枢，更是应激损伤的最敏感 区域n1。 本课题立足于中医脏象及病因病机学说，结合心理应激理论，根据中医的“肝喜条达而 2ll 恶抑郁一、 “肝为刚脏，体阴而用阳的理论，研制成用于调控慢性心理应激反应以及抗 性应激所致损伤)有确切的防治效应，对神经内分泌免疫(NIM)网络紊乱具有良好的整体 调节能力，具有明显的神经免疫药理活性，并推测其机制可能与保护海马神经元、防止其损 伤有关h引。本研究旨在从海马神经元凋亡及糖皮质激素受体(GR)表达角度，研究JWSNS 抗慢性心理应激海马损伤的相关机理。 材料与方法 l材料 动物中心提供，动物合格证号：2002-009。 山栀59、干地黄189、石决明309。药材由广州市药材公司提供，经药剂科鉴定均为纯正药 材，常规煎煮取汁后浓缩至含生药1．699／mL。药液常温冷却后，置4℃冰箱内保存备用。 1．3 主要试剂 高蔗糖(g／L)：(蔗糖80，kcl0．186，CaCl。0．0147，Na2HPq0．142， HEPEs 3．574，Glucose 0．1 箱，冷冻成冰水混合物。)平衡盐溶液EBSS(g／L)：(CaCl。0．2001，YgS04198，KCl0．4， NaCI 6．8，NaH2PO,0．134，Glucose1．0，NaHC032．2．三蒸水配制，调PH值至7．2-7．4。将 0．813，CaCl2 4．144。 乙基磺酸钠19．6，KCl0．194，M薛12 0．0147，HEPES3．574，Glucose 三蒸水配制，调PH值至7．2-7．4)碘化丙啶、RNA酶(博士德公司)GRmRNA检测试