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癌症患者革兰阴性杆菌感染状态流行病学模式建立.pdfVIP

癌症患者革兰阴性杆菌感染状态流行病学模式建立.pdf

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第五届华北地区三省两市检验医学学术会议论文汇编 表2各组T细胞亚群检测结果 (% 冤4-s) 注:与对照组比较+PO.01,‘P0.05 讨论 体液免疫与细胞免疫功能异常在SLE中的作用,已日益为人们所重视,正常的免疫功能,有 赖于各种免疫细胞间的相互协调与制约,产生适度的免疫应答,使之既能清除异物抗原,又不至 于损伤自身组织,已证实CD4、CD8在抑制肿瘤、抗感染和自身免疫性疾病中起重要作用。本文 能紊乱。这种改变与SLE的发生、发展和疾病活动程度有密切关系,与文献报道相一致f31,SLE 患者CD4降低,与CD8的增高并释放可溶性抑制因子有关。也有人『41认为是大量IgG产生抗原抗 L广_2R L广一2及I 体复合物封闭了T细胞的特异受体有关。CD4的减少,其分泌的主要细胞因子I 发生变化,也是SLE患者产生自身免疫的原因之一。而CD8的增高,尤其是具有分泌IL一4的 CD8细胞增高,对B细胞的增殖和分化具有促进作用。文中SLE患者组免疫球蛋白IgG明显增 高,说明B细胞功能亢进,并产生大量自身抗体,这些异常抗体造成对组织器官的伤害,且IgG 量的变化在SLE发病中也起重要作用。 由于不同的淋巴细胞亚群具有不同的免疫功能,故某一亚群的百分比增高或降低,可在SLE 和B细胞免疫功能的紊乱。故检测SLE外周血T细胞和体液免疫,有利于了解机体的免疫状态, 寻找有效方法,重建免疫平衡,调节体内免疫失衡状态,具有重要意义。 癌症患者革兰阴性杆菌感染状态的流行病学模式的建立 王彦张彩云杨贺 保定市第三医院(071000) 材料与方法 1.标本来源: 2007年3月~2010年2月,保定市各医院机构肿瘤患者临床分离革兰阴性杆菌标本1235份。 2.试剂和培养基: (1)细菌培养及试剂:培养基和抗菌药物纸片采用郑州安图绿科生物工程有限公司培养基和 杭州天和公司提供的药敏纸片 (2)耐药基因检测试剂PCR扩增:反应体系分别为引物(100 2.5retool/L)各2.49l,PCR marker 总体积为301-11,其中模板液(10ng/“1)1.0Fd,DNA (3)AmpC基因亚型检测试剂: blaDHA、blaMIR引物,dNTPs,PCR buffer,TaqDNA聚合酶 ·295· 第五届华北地区三省两市检验医学学术会议论文汇编 TaqDNA聚合酶 (4)氨基糖苷修饰蛋白基因检测试剂: 3.实验方法: (1)细菌培养及鉴定:不同来源的标本按照《全国临床检验操作规程》第三版中的要求进行 (2)细菌耐药试验步骤:采用K-B法对鉴定出的革兰阴性杆菌进行药物敏感性试验 (3)药敏试验方法:K-B法按文献进行操作。 (4)p—ESBLs(产超广谱p内酰胺酶)的检测: 采用头孢他啶或头孢噻肟和头孢他啶加棒酸或头孢噻肟加棒酸用K-B琼脂纸片扩散法进行测 定:无菌生理盐水配制0.5麦氏单位的菌悬液涂布于M.H琼脂平板上,判断标准单独头孢菌素纸 片和混有棒酸的头孢菌素纸片抑菌环相差5mm以上,判定细菌产13-ESBLs。 (5)AmpC酶的检测: 三维试验法检测AmpC酶:提取p内酰胺酶:将细菌超声破碎后低温离心;留取上清液。按 参考文献操作(3)进行。将0.5麦氏单位的标准菌株E.coli ATCC25922菌液接种于M.H平皿,取 头孢西丁纸片置于平皿中心,使用自制刀片在离纸片边缘5I/IITI处放射性地由里向外切割一道狭缝 (长15 mm、宽1mm)。用微量加样器取50ul酶粗提物由里向外加

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