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花生内参基因Arah1的克隆和qPCR定量检测.pdfVIP

花生内参基因Arah1的克隆和qPCR定量检测.pdf

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第二十二届学术年会暨产品展示会 论文选集 101 花生内参基因Arahl的克隆与qPCR定量检测 朱丽娜,吴兴泉,谷克仁 (河南工业大学,郑州450001) 摘 要:本研究以花生的内参基因(Arahl)为靶标,研究了花生的qPCR定量检测体系。以花生基 因组DNA为模板,利用Arahl基因特异性引物进行PCR扩增,将PCR产物与栽体连接后转入大 肠杆茵。序列测定结果证明成功获得了花生的Arahl基因片段。以梯度稀释的花生DNA为模板 进行qPCR检测,建立了花生DNA含量与循环阈值Cq间的标准曲线。研究结果显示利用本研究 建立的qPCR检测体系,可建立Arahl基因含量与Cq间具有良好线性关系的标准曲线,适用于花 生样品中Arahl基因的精确定量检测。 关键词:花生;内参基因;Arahl;qPCR Thecloneand detectionofthe quantification referenceofArachis gene hypogaea ZhuLina,Wu Keren Xingquan,Gu (Henan of 450001) UniversityTechnology,Zhengzhou ArahlofArachis wasclonedandthe PCRdetection Abstract:The gene hypogaea quantification ofArahlwas TheArahl was withPCR the technologygene researched. gene amplified using DNAextractedfromArachis as the waslinkedwithclone hypogaeatemplate,gene vector, transferredintoE. coli.andwas Theresultsofthe showedthatthe sequenced. sequenceanalysis Arahl wascloned Theserialdilutionsof DNAextracted genefragment successfully. genome fromArachis weredetectedwith toconstructastandard of curve. the hypogaea qPCR Analysis standardcurVesofArahl and show thatthemethodof has genequantityCq qPCRhigher betweenArahl and tomeet demandsintheaccurate linearity

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