温郁金对胃癌化学预防的实验的研究.pdf

温郁金对胃癌化学预防的实验研究 浙江中医药大学附属第一医院消化科(310006)徐磊俞林峰 吕宾 胃癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤，在我国，胃癌死亡率高居恶性肿瘤死亡率前列，每年约有16万人 死于胃癌．与火多数肿瘤一样，其发病的原因至今没有完全清楚。对于中晚期胃癌目前现有的治疗方法如 手术、放疗、化疗效果均不尽如人意．化学预防是指通过某些人工合成或天然存在的化学物质来逆转、抑 制和预防恶性肿瘤的发生、发展过程，阻断细胞DNA损伤，逆转癌前病变、抑制细胞裂殖、促进细胞的 凋亡等，从而阻止细胞的恶性转化．从肿瘤的始发切断肿瘤发生序列的任一环节，对肿瘤的预防及治疗具 抗氧化剂之中降佗l。温郁金属郁金种类的一种。具有活血化淤，利胆退黄、抗炎、抗肿瘤作用，我们以往 的研究显示温郁金具有抑制胃癌细胞和移植瘤生长的作用．因此，我们从动物实验角度，研究温郁金水蒸 气蒸馏提取液对化学致癌剂N一甲基一N’一硝基一亚硝基胍(MNNG)诱导大鼠胃癌的化学预防作用． 1．材料与方法 1．1材料 温郁金产自浙江温州，6周龄雄性Wistar大鼠80只，平均体重1 80．2009。购自中科院上海动物研究所． 基础饲料饲养于浙江中医药大学实验动物中心，专人管理．MNNG购自Adrich公司，温郁金水蒸气提取 液由本院制剂室制备．塞来昔布购自SEARLE公司． 1．2实验动物分组 II 净水饲养同时予生理盐水5ml灌胃每天一次；B组为造模组，自由饮用浓度为100g／ml的MNNG液同时 5ml 温郁金水蒸气蒸馏提取液5ml每天灌胃一次． 1．3诱癌药物及方法 避光用磁性搅拌机搅拌4小时，使之完全溶解，分装于16只外涂黑油漆的饮水瓶中，由动物自由饮用． 连续40周，第4l周处死动物，B～E组实验初前六周予lO％NacIlmi每周灌胃一次． 1．4动物及标本处理 · 每周测动物体重。专门记录，实验期间死亡的动物均进行解剖，行大体观察并留取组织学标本．实验 结束时大鼠禁食24小时，2．5％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉并处死动物，取出胃，沿大弯剪开．PBS缓冲液 清洗后行大体观察，拍照片，并做记录，随后沿纵轴讲腺胃分成5等分，若发现肿瘤则取下称取重量，测 量长和宽。按照公式(长×宽2)／2计算出肿瘤的近似体积．组织固定于10％福尔马林中，常规石蜡切片， 行H．E染色。 I．5统计学分析 分别相互比较各组动物的体重、肿瘤发生率(患肿瘤动物占实验动物的百分比)、癌前病变发生率、肿 瘤体积。动物体重，肿瘤体积和采用方差分析，肿瘤发生率、癌前病变发生率采用卡方检验，以PO．05为 差异有显著性． 2．结果 2．1大体观察 在整个实验过程中，各组大鼠体重无显著性差异，32只大鼠在实验过程中死亡，其中A组7只，B 组8只，C组4只，D组7只，E组6只，解剖示死亡原因多为肺淤血或者见多个陈旧性出血点，胃大体未 见明显异常，肠内无血便、溃疡、新生物等，肝脏色红柔软，腹腔内未见肿大淋巴结．死亡原因可能为灌 胃时药物误吸入呼吸道，引起肺泡上皮细胞破坏、变性并累及毛细血管壁，使血管通透性增加，血管内液 体渗出引起的水肿及出血性肺炎． 2．2肿瘤发生率 “7 经组织学证实．A组无胃癌发生。B组胃癌发生率为“％(7／16)，C、D、E组的胃癌发生率均为 无显著性差异(P0．05)。D组和E组之间亦无显著性差异。肉眼观察，肿瘤多发生在胃窦部小弯侧，与 人类胃癌好发部位一致，组织学诊断为腺癌。癌旁伴有萎缩、肠化和上皮内瘤变。 2．3肿瘤体积 用直尺分别测量肿瘤的长和宽，按照公式(长×宽2)／2计算出肿瘤的近似体积。B组发生肿瘤的7 cm3、6．61cm3、3．36cm’，B 只大鼠的平均肿瘤体积为11．5cm3,而C、D、E组的平均肿瘤体积分别为4．4 组的平均肿瘤体积火于C、D、E