双核丝核菌新融合群初步鉴定.pdf

38． 中国植物病理学会2006年学术年会论文集 双核丝核菌新融合群的初步鉴定 ofbinucleate fromlesionofrice New蛔ntstomosis Rhizoctonia group spp．isolated ’ sheath blight 李博‘谢甲涛1’2付艳苹1姜道宏‘’2李国庆1’2易先宏1 (1湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室，武汉430070； 2农业微生物学国家重点实验室，武汉430070) 双核丝核菌Binueleate(Rhizoctonia spp．)真菌， spp．)，有性态是角担属(Ceratobasidium 通常以菌丝和菌核的形态习居于土壤，其中有许多是重要的植物病原菌，可引起作物根腐、 茎腐、猝倒和纹枯等。双核丝核菌遗传分化与遗传多样性非常丰富，长期备受国内外学者的 关注。丝核菌类真菌特殊的形态特征及用于分类的孢子难以获得等使其分类和鉴定相当困难。 20世纪70年代提出的菌丝融合群分类法是该类真菌最成功的分类手段，1995年在第二届国 际丝核菌学术大会上确定双核丝核菌融合群以英文字母编号(AG．A—AG．Q)为准不再使用其 他编号，后来又增加了AG．R、S、T、V。菌丝融合群分类法不能提供融合群间或亚群间及融 合群内或亚群内更多的遗传分化及系统演化信息。现代生物学技术为物种的分类和鉴定开辟 为研究包含丝核菌在内的真菌系统发育和进化重要手段；另一方面，日益充实的核酸序列共 享性数据库为物种系统发育和进化研究提供了有力的支撑。研究表明，利用现代生物技术研 2005)。 AG．1 WH．68菌株分离自水稻纹枯病病斑，与水稻纹枯病病菌足solaniIA和水稻角担 菌(Ceratobasidium DAPI染色后在荧光显微镜下观察发现菌丝体细胞中有2个细胞核；菌丝形态具有典型的丝核 菌的特征，即菌丝分枝在其起源处缢缩，分枝菌丝在离起源处不远有隔膜，菌丝分枝呈直角 或锐角，菌丝细胞无锁状联合等。致病力测定表明，WH．68菌株对水稻不具致病力，但可见 其菌丝在水稻叶片上生长，表明可能是腐生真菌。 采用通用引物对其18S 进行了PCR扩增、克隆和测序，结果表明WH．68菌株的18SrRNA基因为1775 bp。Blasm rRNA基因与双核丝核菌 分析(http：／／www．ncbi．nlm．nih．gov)表明WH．68菌株的18S 真菌及真菌病害 39 rRNA基因与 的ITS-DNA为670bp，在GenBank中找不到同源性较高的序列，但其中的5。8S 双核丝核菌的完全相同。在GenBank中下载了Ceratobasidium spp．融合群AG．A—AG．U代 表菌株的ITS．DNA序列，用Ecor I、Mbo I等6种限制性 I、HaeHI、HinfI、HhaI、Taq