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三种沙眼衣原体的检测方法评价 王仲伟 【摘要】 目的探讨聚合酶链反应(PCR)、免梭层析法(C—C快速法)和糖原试验检测泌尿生殖道沙 眼衣原体感染的诊断价值。 方法用三种方法分别对102例送检标本进行平行检测。结果 以PCR 法作参比，免疫层析法敏感性为86．7％，特异性为97．7％；糖原试验敏感性为80．0％，特异性为96．6％。 结论 PCR法有较高灵敏度，免疫层析法有一定灵敏度和专一性，基层医院可以采用。 [关键词]沙眼衣原体；聚合酶链反应；免疫层析法；糖原试验 中图分类号R446．62，R374文献标识码A 文章编号I008—0023(2002)05一0279-02 沙眼衣原体(CT)可导致非淋病性尿道炎、睾丸 中，作用15min，结果二条蓝带为阳性。 附睾炎、盆腔炎、引起男女不育、胎儿流产等病症。 1．3．2 PCR 尤其是女性感染沙眼衣原体后最初无症状或症状 较轻，常被忽视，从而导致严重的合并症。因此，选 择一种简便、快速、特异，敏感度适合的检测方法对 CT感染及早诊断尤为重要。为此，我们对三种检测 0．5U，瞬间离心后，加液体石蜡15“l，扩增。取扩增 方法进行研究，报道如下。 产物lO斗l在琼脂糖凝胶中电泳，紫外灯下观察结果 l材料与方法 I|】o 1．1 临床标本 2000年5月～11月我院妇科、男1．3．3糖原试验刚 性科送检的标本共102份。其中男性46例，用棉拭 子伸入尿道2~4厘米并转动，获取细胞及分泌物； KOH 女性56例，标本用棉拭子沿子宫颈管表面反复滚 ml。加5．4m01／L 动取出，避免与阴道表面接触。 1．2试剂和仪器 0．5ml双蒸馏水，1ml29／L蒽酮溶液煮沸20min，室 1．2．1 温冷却。样品在波长620nm分光光度计测A值，结 免疫层析法试剂盒英国Unipath公司生 产的Clean，iew男女两用衣原体快速检测试剂盒。 1．2．2 PCR试剂及仪器 附表 免疫层析法，糖原试验与PcR检测的结果比较 Taq酶为上海Promega 公司产品。dNTP为Sigma产品。引物序列为CTl：5一 CCTGTGGGGAATCCTGCTGAA一3．CT2：5一GCAAG． GATCTCCGCCGAAACC一3产物大小为144bp。蛋白 酶K为Merck产品。PCR仪器产地为Precision Scientific。 x铷_65 与PCR比较o f’O．05 1．2．3糖原试验试剂及仪器葡萄糖、硫酸、 为阴性。 KOH、无水乙醇、蒽酮均为国产试剂。 2结果 1．3方法 免疫层析法，PCR和糖原试验平行检测102例 1．3．1 免疫层析法 按试剂盒中操作说明进行， 标本结果，并以PCR法作对照，结果见附表。． 标本加入0．6毫升试剂I提取缓冲液，80℃水浴加 、 3讨论 热10～12min，冷却，加5滴过滤液到测试卡检体窗 PCR检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染已有报 作者单位：325405浙工省平阳第二人民医院 道，已被公认为是诊断主要手段之一㈣。其特点是快 作者简介：王仲伟，男，汉族，浙江平阳人，检验师．1989．9一速，敏感，特异且适用于多种临床标本，特别对筛查 1992．