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g/mL浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为
中黄芩苷的含量测定方法。黄芩苷在6.0’30.O/J
100.18%,RSD为0.88%。该方法简便快速、重现性好,结果准确可靠,可作为一种快速测定双黄连
颗粒中黄芩苷含量的分析方法。
2.5基于中药小分子单克隆抗体的免疫分析法(ELISA)
目前的研究进展不仅包括上述检测仪器上的不断更新,还包括新技术方法上的应用。近些年,
随着中药小分子单克隆抗体的发展,有学者提出使用免疫分析技术对中药成分进行研究。免疫分析
方法具有特异性强,灵敏度高,前处理简单,快速,重复性好等特点,与传统理化方法在原理上有
本质不同,是一种全新的中药检测手段。
目前国内外已有学者对此有所研究。李翼飞制备出了葛根素的单克隆抗体,并建立了相应的免
疫分析方法,检测范围在15.6’500
ng·mL-1之间,灵敏度是高效液相的几十倍。苏歆等利用制
备出的黄芩苷单克隆抗体建立了相应的免疫分析法,该方法线性范围为2.67~1029.00ng·mL一1,
组内和组间差异均不超过3.31%,平均回收率为100.97.,并且采用该方法检测精制清开灵注射液中
黄芩苷的含量,所得结果与HPLC一致。KimJS等制备出了小檗碱单克隆抗体,建立了相应的免
疫分析方法,检测范围为1.56’25Ⅳg/mL,并运用该方法测定比较了含小檗碱不同药材中小檗碱
的含量。ShaojieShan等制备出甘草酸单克隆抗体并建立了免疫分析方法,检测范围为20’200
ng/mL。
3结语
综上所述,葛根芩连汤中四种主要活性成分的含量测定方法主要分为高效液相色谱法,薄层色
谱法,毛细管电泳法,分光光度法等方法。高效液相色谱法是目前检测中药活性成分最常用最成熟
的方法。Ic—ELISA法优势主要体现在:1.与常规理化分析技术相比,具有特异型强、灵敏度高的特
点,甚至可检测到飞摩尔或亚飞摩尔低浓度水平;2.方便快捷,取样量少,前处理简单,可以实现
高通量平行检测,仪器化程度低,分析效率约为HPLC或Gc的几十倍。利用此技术不仅可以分析中
药复方中活性小分子在血液、器官或组织中,甚至可以制成小分子胶体金试纸条、试剂盒等为科研
工作者服务:从而为中药质量控制以及阐明中药复方作用机制奠定了基础。因此,免疫分析方法在
中药小分子活性物质检测分析中的应用有重要意义,其选择性和灵敏度要高于其他的理化方法,组
织中其他物质对测定结果的干扰很小,尤其适合应用于中药复方体内过程研究,配伍规律研究等方
面,是目前中药活性成分检测的重要发展方向。
葛根芩连汤配伍浅析
北京中医药大学冯会宾单文超屈会化赵琰王庆国‘
葛根芩连汤载于《伤寒论》,组方为葛根半斤,甘草二两(炙),黄芩二两,黄连三两,主要
用于表里皆热的邪热下利之证。其煎法为先煎葛根,取其解肌清肠作用;后以黄芩、黄连清里热,
坚阴止利,甘草扶中护正、i周:tl,Y利,最终达到诸药相伍的目的,表解里清而下利止,咳喘平。近
年来国内外医学家通过实验研究证明葛根芩连汤具有解热、抗菌、抗病毒、解痉、抑制胃肠运动等
药理作用。
+北京中医药大学“经典方剂的应用基础研究”创新团队。
343
配伍理论体现了中医治病的特色,是辨证论治的直接表现,是理法方药的统一,是保证临床疗
效的关键。配伍的实质是多种化学成分的协同作用和拮抗作用。关于葛根芩连汤配伍规律的现代研
究,一般主要是用药理及化学的方法探讨中药配伍与药理效应和化学成分变化之问的关系,即通过
复方配伍~化学成分变化一药理效应三者之间的相互联系研究配伍规律。在具体实验设计中,有单
纯用药味进行组合进行研究,亦有均匀设计法,正交设计法,拆方法,本实验团队主要通过中药小
分子单克隆抗体技术研究其配伍关系。
1配伍作用与药理及化学成分变化的关系
抑菌作用:葛根芩连汤体外抑菌试验显示对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌均有一定
的抑制作用,体内实验表明对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌亦有明显的抑制作用。通过
拆方法,对肺炎链球菌和埃希氏大肠杆菌抑菌作用研究显示,抑菌作用药物主要为黄连与黄芩。采
用兔盲肠分流术后直接结肠内接种,制作菌瘌兔模型,按正交设计法,观察葛根芩连汤各配伍组合
对菌痢模型的肠内容物细菌计数及肠组织内细菌计数、结肠炎指数的影响,结果以黄连
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