ISSR_PCR技术在植物种间和种下关系中的应用.pdfVIP

( ) 第 25卷 　第 4 期 　　2006年 4 月 　　　　　　　　　　　种 　子 　 Seed 　　　　　　　　　　Vo l. 25　No. 4　Ap r. 　2006 ISSR PCR 技术在植物种间和种下关系中的应用 1 1 1, 2 邓 辉 　黄晓燕 　乙 引 ( 1. 贵州师范大学生物技术与工程学院　贵阳　55000 1; 2. 贵州师范大学贵州省山地环境重点实验室 　贵阳　55000 1) 摘要 : ISSR PCR ( intersimp le sequence rep eatPCR )标记技术是 1. 2　ISSR 技术关键步骤 在 SSR PCR 基础上发展起来的一项新的 DNA 分子标记技术 , 运用 ISSR 标记技术时 ,并不是每个引物都适合所 具有操作简便 、重复性好 、多态性高等特点 。本文对 ISSR 技术 有物种 ,因此筛选出多态性强 、可重复性好的引物是 及其在植物种间和种下关系中的应用进行了概述 。 ISSR 技术中最关键 、最重要的一步 。引物的总长度一 关键词 　ISSR 　种间和种下关系 　应用 般为 16 ～18 bp ,基因组中 SSR 一般以 2 ～6 个寡聚核 苷酸为重复单位 ,用于 ISSR 的引物常为 5 ’或 3 ’端加 近年来 ,分子标记的研究与利用得到了迅速的发 锚的二核苷酸 、三核苷酸 、四核苷酸重复序列 ,重复次 展 。对不同分子标记技术的选用 ,主要取决于应用 目 ( ) 数 n 一般为 4 ～8次 , 5 ’或 3 ’端用于锚定的碱基数 目 的和研究对象 ,理想的分子标记应既简单又可靠 。目 一般为 1～4 个 。 前应用于植物中的 DNA 分子标记主要有限制性片段 ( ) 1 植物基因组中最多的 SSR 是二核苷酸重复序 ( ) ( ) 长度多态性 RFL P 、随机扩增多态性 DNA RA PD 、 ( ) 列 Zietk iew iczetal. , 1994 ,在选择 ISSR 引物时 ,应 以 ( ) 扩增酶切片段长度多态性 A FL P 、序列标志位 点 二核苷酸重复序列为主 ,少选寡聚三核苷酸重复序列 、 (