“检测生物组织中的油脂、糖类和蛋白质”实验解读.doc

“检测生物组织中的油脂、糖类和蛋白质”实验解读 一、原理解释 本实验是鉴定类实验，要鉴定某种物质的存在需根据被鉴定物质的性质确定科学的鉴定方法。一般原理是根据某些化学试剂与所鉴定的物质发生特定的反应设计不同的实验来鉴定这些物质的存在。因此可以利用化学试剂进入细胞内与相应的化合物结合显示出特有的颜色，如用苏丹Ⅲ检测油脂；也可以把细胞中的化合物提取出来，加入相应的化学试剂显示出特有的颜色，如糖类、蛋白质的检测。 1．本尼迪特试剂检测还原糖。可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与本尼迪特试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。其反应的本质是：葡萄糖＋Cu(OH)2 葡萄糖酸＋Cu2O↓（砖红色）＋H2O，即Cu(OH)2被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用本尼迪特试剂检测还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→红黄色（沉淀）。本实验中，用本尼迪特试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能检测非还原性糖。 2．苏丹Ⅲ染液检测油脂。苏丹Ⅲ染液与油脂具有很强的亲和力，油脂易被苏丹Ⅲ染液染成橙黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色），而其他非油脂物质则不易被染色。 3．碘－碘化钾检测淀粉。淀粉遇碘－碘化钾溶液显蓝色。 4．双缩脲试剂检测蛋白质。双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液（双缩脲试剂A液）和质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液（双缩脲试剂B液）。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽健，因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。 例1、现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液各一瓶，可用双缩脲试剂、本尼迪特试剂和淀粉溶液将它们鉴定出来。请回答： （1）用一种试剂将上述4种溶液区分为两组，这种试剂是　　　　，其中发生显色反应的一组是　　　　和　　　　溶液，不发生显色反应的一组是　　　　和　　　　溶液。 （2）用　　　　试剂区分不发生显色反应的一组溶液。 （3）区分发生显色反应一组溶液的方法及鉴定结果是　　　　。 解析：由题目分析可知：双缩脲试剂可与蛋白质发生反应；本尼迪特试剂可与还原糖反应；淀粉可在淀粉酶的作用下产生还原糖，这样就可以根据特定的颜色反应，判断出相应溶液的名称。（1）由于稀蛋清和淀粉酶溶液的本质是蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应，而葡萄糖和淀粉不与双缩脲试剂反应，所以可用双缩脲试剂将4种溶液分为两组；（2）葡萄糖属于还原糖，可与本尼迪特试剂作用产生砖红色沉淀，而淀粉不能，所以可用本尼迪特试剂将淀粉和葡萄糖分开；（3）淀粉可被淀粉酶分解形成还原糖，还原糖可与本尼迪特试剂反应产生砖红色沉淀，而蛋清无这一特性，所以可以用淀粉将稀蛋清和淀粉酶区分开。 答案：（1）双缩脲试剂　　稀蛋清　　淀粉酶　　葡萄糖　　淀粉　　（2）本尼迪特　　（3）将淀粉溶液分别与发生显色反应的两种溶液混合，一段时间后，用本尼迪特试剂分别处理上述两种混合液，观察到无颜色变化的溶液是稀蛋清溶液，出现砖红色沉淀的溶液是淀粉酶溶液 二、材料选择 实验要成功，选材是关键，选择的材料本身应无色或近乎无色，且应富含相关物质。实验过程中应注意检测不同物质时的特殊操作步骤。例如，在检测油脂的实验中要进行徒手切片和使用高倍显微镜；在检测还原糖时应水浴加热等。 1．做可溶性还原性糖鉴定实验，所选的材料中必须含有较多的还原性糖，而且要求颜色较浅以免干扰实验结果的观察，常选用颜色为白色的植物组织如苹果、梨，不用甘蔗（还原糖含量很少）或西瓜汁、番茄汁（红色）代替。 2．做油脂的鉴定实验，应选富含油脂的浅色材料，如花生种子、蓖麻种子等，尤以花生种子为最好。实验前一般要浸泡3～4小时（如果是新花生种子，可以不必浸泡），若浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。油脂检测时也可将浸泡过的花生种子制成匀浆，向待测样液中滴加苏丹Ⅲ染液，然后观察样液染色的情况。 3．做蛋白质的鉴定实验，动物材料可以选用蛋清，但蛋清溶液必须稀释防止实验后粘住试管，不易刷洗。若植物材料可用富含蛋白质的黄豆种子（或直接选用豆浆）。 例2、在生物组织中还原糖、油脂、蛋白质的检测实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（　　） A．甘蔗的茎中含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行还原糖的检测 B．花生种子含油脂多且子叶肥厚，是用于油脂检测的理想材料 C．大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质检测的理想植物组织材料 D．鸡蛋清含蛋白质多，时进行蛋白质检测的动物材料 解析：甘蔗的茎中含有较多的糖且近于白色，但甘蔗茎中所含的是蔗糖，还原糖含量很少，一般不作为进行还原糖的检测。 答案：A 三、方法步骤 1．还原糖鉴定 选材（含还原性糖多，颜色浅的植物组织）→制备组织样液（去